超声造影剂对大鼠局灶性肝损伤的评价及对基因转染的作用

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第一部分Wistar大鼠肝脏超声声像图表现及相关应用目的明确Wistar大鼠肝脏声像图表现,探讨大鼠肝脏在超声医学实验研究中的应用。材料与方法Wistar大鼠40只,利用高频探头观察肝脏二维图像;将大鼠随机分为2组,每组20只,超声监视下经皮将美蓝溶液(0.05ml~0.1ml/只)注入肝左外叶(组1)或右侧各分叶(组2);尾静脉团注超声造影剂观察肝脏造影过程;处死动物,检查肝叶间有无美蓝溶液渗出;摘除肝脏,测量各分叶。结果在高频探头下隐约可见大鼠肝脏各叶的纤细分界;组1无美蓝渗出,组2有5/20例发生渗出;所有病例可清晰显示肝脏微泡造影的动脉相、门静脉相和平衡相。结论高频探头可以区分Wistar大鼠肝脏的部分分叶,肝左外叶易于在超声下辨认,有利于在超声监视下进行准确的穿刺操作;大鼠肝脏可用于微泡造影剂成像等超声实验研究,但其动脉相和门静脉相持续时间短,针对这两个时相的研究可能会受到一定的影响。第二部分超声造影剂对大鼠局灶性肝损伤的评价目的利用超声造影剂评价局部注射无水酒精所致大鼠肝损伤的声像图改变。材料与方法选用200克左右成年Wistar大鼠20只,在超声监视下对大鼠肝左外叶局部注射无水酒精0.05ml~0.1ml,对病灶用二维超声、彩色多普勒及能量多普勒继续观察并予以记录。7天后,对病灶再次进行超声探查,通过尾静脉通道团注超声造影剂0.05ml/200g,利用反向脉冲谐波成像模式对病灶进行观察并记录。对肝左外叶取材制作石蜡切片进行病理检查。结果二维超声图像上不能明确显示消融的病灶范围。用CDFI和CDE检查,6/20个病例在消融前可在局部组织检测到血流信号。所有病例超声造影后均可清晰显示消融病灶。超声造影后所测病灶大小及病理实测病灶大小有良好的相关性(r=0.97),二者之间没有明显差异(P=0.39)。结论二维超声、彩色多普勒和能量多普勒对无水酒精肝脏局部注射所致消融病灶的判断作用有限,注射超声造影剂后在反向脉冲谐波成像模式下可清晰显示消融病灶,可用于准确评价消融病灶的大小。而利用超声造影成像方法反映更细微的病理学变化有待于进一步研究。第三部分超声微泡造影剂对基因转染的作用目的评价新型超声微泡造影剂在诊断超声照射下对绿荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)质粒在Wistar大鼠胫前肌中表达的作用。材料与方法选用200克左右成年Wistar大鼠40只,随机分为四组,每组10只,第一组对大鼠胫前肌只注射GFP质粒;第二组对大鼠胫前肌注射GFP质粒和造影剂的混合物;第三组对大鼠胫前肌注射GFP质粒和造影剂的混合物并加超声照射;第四组为阴性对照。12天后处死动物,取胫前肌标本,制作冰冻切片后立即在荧光显微镜下观察。计数GFP阳性表达细胞数。部分组织经甲醛固定、石蜡包埋,光镜下观察病理改变。结果第三组GFP阳性表达细胞数最多(345±19),与第一组(109±15)、第二组(111±14)有明显的差异(P<0.01)。第一组、第二组间无明显差异(P=0.784)。所有受检组织光镜下检查未发现出血、坏死、炎症等病理改变。结论新型超声微泡造影剂在诊断超声照射下可以促进局部注射GFP质粒在大鼠胫前肌的转染。
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