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目的:本研究通过对儿童粪便标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行β-内酰胺酶和质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因的检测，明确儿童肠道中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs和PMQR基因的携带情况;通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)等，了解耐药菌株之间的分子流行病学情况。 方法:纸片扩散法筛选耐药菌株;琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度(MIC);PCR扩增β-内酰胺酶（blaTEM、blaSHV和blaCTX-M）和PMQR(qepA、qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6)-Ib、oqxA和oqxB）基因，研究细菌对头孢菌素类抗生素和喹诺酮类抗生素耐药的分子机制;脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和系统发育分型（phylogenetic group）等分子分型研究菌株之间的同源性关系。 结果:儿童粪便分离的肠杆菌科细菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为常见。从114份儿童粪便标本共分离到98株(64.9％)大肠埃希菌和18株(11.9％)肺炎克雷伯菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率分别为45.9％(45/98)和38.9％(7/18)。产ESBLs大肠埃希菌以CTX-M-14和CTX-M-55基因型为主。产ESBLs肺炎克雷伯菌以CTX-M-14和CTX-M-15基因型为主。首次在临床菌株中发现了blaCTX-M-104基因，以及检测到了嵌合重组型blaCTX-M-123。系统发育分型显示，产ESBLs大肠埃希菌以D型为主(42.2％，19/45)，其次为A型(26.7％，12/45)，B2型(20％，9/45)，B1型(11.1％，5/45)。MLST分型显示，产ESBLs大肠埃希菌以CC10、ST38、ST131、ST648和ST69为主，发现了1种新型ST型。7株产ESBLs肺炎克雷伯菌的ST型均不同，同时发现了3种新型ST型。PFGE表明产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均为不同克隆菌株。儿童肠道中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对环丙沙星的耐药率分别为27.6％(27/98)和5.6％(1/18)。PMQR的检出率为6.9％(8/116)，其中oqxAB、qnrS1和aac(6)-Ib-cr的检出率分别为4.3％(5/116)、2.5％(3/116)和2.5％(3/116)。所有PMQR均在产ESBLs菌株中检出，aac(6)-b-cr，oqxAB和qnrS1为本研究中主要的PMQR型。 结论:儿童粪便分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢菌素类和喹诺酮类抗生素的耐药率均非常高。肠杆菌科细菌ESBLs携带率高达37.7％，基因型以blaCTX-M-14和blaCTX-M-55为主。CTX-M型ESBLs的产生是肠杆菌科细菌对头孢菌素类抗生素耐药的主要原因。产ESBLs大肠埃希菌以B2-ST131，D-ST648，D-ST38，A-CC10，D-ST69为主要的ST型。儿童肠道PMQR携带率为13.4％(7/52)，PMQR的检出率为6.9％(8/116)。基因主要包括aac(6)-Ib-cr，oqxAB和qnrS1。所有PMQR均在产ESBLs菌株中检出，PMQR基因与ESBLs基因之间具有一定的相关性。