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白鹤藤(Argyreia acuta Lour.)为旋花科银背藤属植物,又名一匹绸、白面水鸡等,主要分布于我国广西、广东、云南等地。白鹤藤药理药效的研究表明,该植物具有较好的止血、促凝血活性,民间常用来止血,但是对于最佳止血、促凝血活性的提取溶剂以及止血活性部位尚未见进一步的报道;化学成分的研究表明,其含有皂苷类、酚酸类、黄酮类等多种成分,且本课题组前期已对白鹤藤的石油醚、氯仿萃取部位进行分离,也证实了该植物化学成分的多样性。本文在此基础上更进一步的考察白鹤藤具有最佳止血、促凝血活性时的提取溶剂;初步筛选有止血、促凝血活性的有效部位;并对白鹤藤乙酸乙酯和正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化与鉴定。实验内容和结果如下:(1)最佳止血、促凝血活性提取溶剂筛选:分别以水、50%乙醇、70%乙醇和95%乙醇作为白鹤藤的提取溶剂,以白鹤藤水提组、50%醇提组、70%醇提组和95%醇提组给药(给药剂量为12.0g生药/kg)。通过测定出血时间BT(小鼠断尾法)、凝血时间CT1和CT2(毛细玻管法和玻片法),考察四种溶剂提取物的止血、促凝血活性。结果显示:四种溶剂提取物均能不同程度的缩短出血和凝血时间,70%乙醇提取物对出血和凝血时间的影响最大,止血、促凝血效果最佳。(2)止血、促凝血活性的有效部位筛选:选用D101型大孔吸附树脂将白鹤藤70%乙醇提取物,分为不同部位:水部位、30%乙醇部位、60%乙醇部位、80%乙醇部位和95%乙醇部位,通过测定出血时间BT、凝血时间CT以及各凝血因子:血浆复钙时间PRT、凝血酶原时间PT、活化部分凝血酶时间APTT,筛选具有止血、促凝血活性的有效部位。结果表明:大孔吸附树脂洗脱的60%、80%及95%乙醇部位均具有止血、促凝血的作用。60%和80%乙醇部位通过影响外源性和内源性两种途径的凝血因子起到止血、促凝血的作用,而95%乙醇部位则是通过影响外源性凝血途径的凝血因子起到止血、促凝血的作用。(3)化学成分的研究:采用硅胶柱层析、ODS、HPLC、制备液相等方法对乙酸乙酯和正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化,并利用UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS、HMBC、HSQC、TOCSY等波谱技术对得到的单体化合物进行结构鉴定。从中分离并鉴定得到13个单体化合物。分别为:Acutacosides I(1);Acutacosides II(2);Acutacosides III(3);Prosaponin A of dioscin(4);薯蓣皂苷(5);纤细薯蓣皂苷(6);3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(7);3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯(8);3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(9);3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(10);邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(11);胡萝卜苷(12);β-谷甾醇(13)。其中化合物(1-11)是首次从该植物中获得,化合物(1-3)为新化合物。