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本文采用表观分类的方法对本实验室2003年自斯氏线虫体内分离出的一株共生菌高毒力菌株5-5B进行了形态观察及生理生化特征的测定。结果表明:5-5B菌株的形态特征和生理生化特点与致病杆菌属中已知五种中的嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophilus)的特征较为一致,据此根据表型特征的分类方法可以判断该菌株为致病杆菌属(Xenorhabdus nematophilus)嗜线虫致病杆菌种下一个株系。
研究了昆虫病原线虫共生菌5-5B菌株的发酵条件,结果表明:5-5B菌株的最适生长温度为28℃,最适起始pH值为7.3~7.8,最佳振荡频率为160r/min,装液量为40 ml/250ml,接菌量为4%。5-5B菌株发酵液对小菜蛾初孵幼虫的杀虫活性研究表明,装液量为40ml/250ml时,校正死亡率为62.78%;接菌量为4%时,校正死亡率为63.84%;起始pH为7.3时,校正死亡率为65.49%。
测定了发酵液中糖、蛋白质,氨基氮含量变化,DO值的总体变化规律为急剧下降到零,4h后开始逐渐上升,最后稳定在121;总糖和还原糖的含量具逐渐降低的趋势,在28h后分别稳定在0.41mg/ml,0.58mg/ml左右;利用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的变化,0~8h之间,蛋白质的含量缓慢下降的,从第8h始,至第24h之间急剧下降,24h后回升,40h后蛋白质含量稳定在0.18左右;氨基氮的变化规律为随着时间的延续,氨基氮的含量总体趋势是逐渐增加的,在第52h时达到最高为0.38mg/ml。
筛选发酵所需碳源、氮源和无机盐,最佳碳源为2%的葡萄糖,产菌量最大为1.8×10<-9>个/ml;最佳氮源为0.5%牛肉膏,产菌量最大为2.32×10<9>个/ml;最佳无机盐为0.2%磷酸氢二钾(K<,2>HPO<,4>),产菌量最大为1.29x10<9>个/ml。
采用5-5B菌株对15种植物病原真菌的菌丝抑菌进行了试验,结果表明,对其中的5种效果相对较好。病原真菌培养到第5d,分别稀释2倍,5倍,10倍,20倍,40倍,60倍浓度后,对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea的抑制率分别为100%,76.1%, 53.1%,42.8%,37.0%,33.3%;对玉米弯孢菌Curbularia lunata菌丝的抑菌率分别为:67.7%,46.9%,42.8%,38.8%,32.8%,28.9%;对番茄煤霉菌B.cinerea抑菌率分别为:87.1%,41.9%,21.0%,22.8%,11.7%,8.2%;对小麦赤霉菌Gibberella zeae菌丝的抑制率分别为:68.4%,27.5%,19.1%,16.1%,13.1%,11.6%;对小麦根腐病菌B.sorokiniana菌丝的抑制率分别为:64.8%,33.0%,30.2%,27.8%,15.2%,14.1%。