目的:探究骨髓间充质干细胞外泌体对肾癌细胞增殖与迁移能力的影响;明确骨髓间充质干细胞外泌体源性miRNA对肾癌细胞脂质代谢的影响及分子机制。方法:首先通过透射电镜和免疫印迹对提取的骨髓间充质干细胞外泌体进行鉴定,随后通过外泌体摄取实验验证骨髓间充质干细胞外泌体可被肾癌细胞摄取;利用EdU实验检测肾癌细胞的增殖能力;利用流式细胞学观检测肾癌细胞的凋亡率和周期变化;采用Transwell实验检测肾癌细胞迁移能力;采用液相色谱质谱联用的脂质组学分析肾癌细胞脂质代谢物差异。采用组织细胞总胆固醇试剂盒测定总胆固醇水平。采用Western blot和RT-q PCR检测胆固醇代谢途径关键酶以及MAPK/ERK信号通路标志物的表达。采用在线数据库预测可靶向调控CYP7A1的miRNAs,采用RT-q PCR验证其在mBMSC外泌体中的表达。通过mBMSC与Renca细胞共培养,探究mBMSCs-Exo源性miR-30b-3p对Renca细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。结果:骨髓间充质干细胞上清液中成功提取分离骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜下呈典型的“杯口状”囊泡,Western blot结果发现外泌体标志性蛋白CD63、CD9高表达,且摄取实验表明骨髓间充质干细胞外泌体可被肾癌细胞摄取。细胞功能实验结果表明,与对照组相比,骨髓间充质干细胞外泌体处理后的肾癌细胞的增殖和迁移能力均增加。液相色谱质谱联用脂质组学分析提示外泌体处理后肾癌细胞中牛磺熊去氧胆酸明显降低,胆固醇升高。此外,骨髓间充质干细胞外泌体可上调HMGCR并下调CYP7A1、CYP7B1表达以影响肾癌细胞胆固醇代谢,促进肾癌细胞增殖和迁移。瞬转和质粒过表达CYP7A1后结果提示:si-CYP7A1可抑制肾癌细胞的凋亡,促进其增殖和迁移;而质粒过表达CYP7A1可促进肾癌细胞凋亡,抑制其增殖和迁移。CYP7A1可经MAPK/ERK信号通路调控胆固醇代谢。生物信息学在线数据库预测靶向负调控CYP7A1的miRNAs共有99个,最后发现miR-30b-3p在骨髓间充质干细胞外泌体及骨髓间充质干细胞外泌体处理后的肾癌细胞中高表达。结论:骨髓间充质干细胞外泌体源性miR-30b-3p可通过调控肾癌细胞内胆固醇代谢关键酶CYP7A1的表达及MAPK/ERK信号通路以影响细胞胆固醇代谢,从而调控肾癌的发生发展。