黑斑原(魚兆)同工酶的研究

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黑斑原鮡Glyptosternon maculatum,是鰋鮡鱼类(Glyptosternoid catfishes)的一种,为冷水性高原鱼类,分布于我国西藏境内的雅鲁藏布江中游(谢通门至波密江段)及印度的布拉马普特拉河(Brahmaputra)。关于黑斑原鮡的研究,多集中于分类、生物地理学及鰋鮡鱼类系统演化、进化等方面,目前为止,尚无黑斑原鮡群体或鰋鮡鱼类生化遗传方面的研究报道。 本研究通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),以肌肉组织为材料,分析了2003年采集于雅鲁藏布江谢通门江段、支流拉萨河和尼羊河黑斑原鮡群体的14种同工酶,根据遗传相似度(I)和遗传距离(D)检验海拔高度不同的黑斑原鮡群体之间是否发生显著遗传分化现象,并进行遗传变异分析;另外,以心脏、肝脏、脑、眼、肌肉、脾脏和肾脏等组织为材料,对2005年采集于尼羊河黑斑原鮡样本进行同工酶组织特异性研究,并利用多态性高的组织进行其群体遗传变异情况。笔者依其生境状况和黑斑原鮡自身遗传变异情况提出了黑斑原鮡种质资源保护的措施。此外,本研究可为黑斑原鮡种质资源的研究、应用和保护提供可参考的生化遗传资料和理论基础。 研究的主要结果如下: 1.黑斑原鮡同工酶表达无性别差异; 2.黑斑原鮡不同地理群体生化遗传差异不显著; 3.腹腔外肝和腹腔内肝同工酶表达无差异,即从同工酶方面证明腹腔外肝同腹腔内肝生理功能一致; 4.黑斑原鮡同工酶表达具有组织特异性:ADH同工酶在肝脏中谱带最多,活性最强,在肌肉中谱带最少,活性最弱;AO仅表现出肝型(Ao—A4)和肌型(Ao—B4),前者活性较强;EST同工酶在肝脏表达为活性较强的5条带,脑和脾脏仅有1条带,其余组织未见酶带;GDH同工酶在肝脏中优势表达,在眼中活性最弱;Ldh—A4在肌肉中优势表达,—B4在肝脏、心脏和脾脏中优势表达,在肝脏、脾脏和肾脏组织中检测到Ldh—C4同工酶;MDH和MEP同工酶均检测到上清液型(s)和线粒体型(m),均在肝脏中优势表达;肌肉组织中未见GcDH和POD酶带;SDH同工酶在心脏、眼和肌肉组织中均仅有1条酶带表达,其他组织表达为2条酶带;SOD同工酶仅在优势表达的肝脏组织中检测到s—SOD和m—SOD,其他组织只有m—SOD同工酶表达; 5.黑斑原鮡同工酶多态性较高,2次研究共定位检测到10种酶的27个基因座位,其中,14个座位表现为多态,总多态座位比例为0.5185,多态座位比例因组织不同而异:肌肉>心脏>肝脏;群体平均杂合度观测值(Ho)和期望值(He)也因组织而异:肝脏>心脏>肌肉,变化范围为分别为0.0201~0.0533、0.0310~0.0485,平均值分别为0.0370、0.0405,群体遗传变异能力较弱; 6.经X2检验证明,黑斑原鮡种群符合Hardy—Weinberg基因平衡定律; 7.检测到6个多态座位偏离Hardy—Weinberg平衡,由遗传偏离指数d证明,Adh—A(在肝脏中表达时)和Ldh—B座位(在心脏和肝脏中表达时)存在杂合子过剩现象;Adh—B(在心脏和肌肉中表达时)、s—Mep—A(在肌肉中表达时)、s—Mep—B(在心脏和肌肉中表达时)和m—Mep—C座位(在肝脏中表达时)杂合子缺失现象严重,其中,s—Mep—A和s—Mep—B座位上具有哑等位基因表达。
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