氟比洛芬—壳聚糖原位水凝胶的制备及用于大鼠切口镇痛的效果

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【目的】⑴制备氟比洛芬(Flurbiprofen,FP)-壳聚糖(Chitosan,CS)载药原位水凝胶(简称凝胶),并检测其相变行为及载药能力;⑵按Brennan法建立疼痛模型,采用累积疼痛评分法对凝胶在大鼠切口局部应用的缓释镇痛效果做初步探讨。【方法】⑴建立FP紫外分光光度含量检测方法,绘制FP标准曲线、测定FP回收率和精密度;⑵使CS醋酸溶液、NaHCO3溶液在一定条件下混合,将设定质量的FP粉末投入上述混合溶液中,制得FP理论含量为0mg?ml-1、1mg?ml-1、3mg?ml-1、5mg?ml-1的溶胶样品,将所得样品分别编号为0号、1号、2号、3号;⑶用PH计测定溶胶、凝胶PH值;紫外分光光度含量检测方法检测凝胶载药量、载药效率和精密度;采用试管倒置法检测凝胶化时间;⑷选取SD大鼠48只,体重250g±16g,随机分为6组(n=8):A组(空白对照组A)、B组(空白对照组B)、C组、D组、E组和F组。每组均建立Brennan’s大鼠疼痛模型,术毕经切口分别给予生理盐水、0号凝胶、FP原料药、1号凝胶、2号凝胶、3号凝胶(后四组的给药剂量均以10mg/kg计算)。采用累积疼痛评分(cu-mulative painscores ,CPS)法分别于术前2h(基础值)、术毕2h、4h、6h、12h、24h、48 h、60h、72h、96h对大鼠进行累积疼痛评分,以此评估各组药物对大鼠术后疼痛的镇痛效果。【结果】⑴紫外分光光度分析法完成FP的检测体系,FP在247nm波长处有最大吸收,在1.0-10.0ug/ml范围内,FP的浓度与吸光度有良好的线性关系,标准曲线方程:C=12.4825A-0.1631,R=0.9999;平均回收率(n=9)为99.15±0.69%,日内RSD=0.47%,日间RSD=0.72%;⑵完成FP-CS载药凝胶的制备。凝胶PH值大于溶胶,体外实验显示37OC凝胶化时间约30-40min。⑶1-3号凝胶载药效率分别为:97.95±0.73%、96.64±0.74 %、94.98±1.57%。日内RSD分别为0.44%、0.35%、0.15%;日间RSD:0.88%、0.71%、0.39%。⑷完成48例大鼠疼痛模型的建立,各组CPS评分如下:术后各时点六组CPS均显著大于术前2h基础值(P<0.05),差异有统计学意义;对照组A组、B组在术后整个观察期间的评分值稳定在高值,两两比较差异无统计学意义(P>0.05);C组评分值在术后6h内小于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05),与E、F组比较差异无统计学意义(P>0.05),6h后,C组评分值增大,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。D、E、F组CPS在72h内均小于对照组(P<0.05),其间D组分值大于E组和F组(P<0.05),72h后,D、E、F组CPS与A组、B组差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】⑴FP回收率和精密度显示其重现性良好,采用紫外分光光度法检测FP含量简便可行;⑵本制剂在体外实验中显示了溶胶-凝胶转变特性,并能使FP较完全的进入凝胶骨架内;⑶FP-CS凝胶应用于切口局部具有明显的镇痛效果,镇痛时间长达72h;⑷FP含量3mg?ml-1和5mg?ml-1的凝胶镇痛作用高于1mg?ml-1的凝胶制剂,前两者镇痛效果无差别,与FP原料药相当。
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