【摘 要】
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目的:通过建立新生SD大鼠动物模型模拟新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的发生发展过程,探讨新生大鼠HIBD模型血清神经丝蛋白H磷酸化亚型(phosphorylation subtype of neurofilament protein H,pNF-H)与泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl terminal hy
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目的:通过建立新生SD大鼠动物模型模拟新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的发生发展过程,探讨新生大鼠HIBD模型血清神经丝蛋白H磷酸化亚型(phosphorylation subtype of neurofilament protein H,pNF-H)与泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl terminal hydrolase L1,UCH-L1)蛋白表达水平的变化。方法:将252只日龄7d的健康SPF级SD大鼠(乳鼠)随机分为实验组与对照组,实验组为HIBD组(A组),对照组包括假手术组(B组)和空白对照组(C组),A、B、C三组每组84只;各组组内又分为7个亚组:6h组、12h组、24h组、48h组、72h组、5d组及7d组,每亚组12只。HIBD组(A组)参照参考文献方法制备乳鼠HIBD模型,即分离左侧颈总动脉后行缺血处理(左侧颈总动脉双重结扎并离断)+缺氧处理(120min);假手术组(B组)分离左侧颈总动脉后不做缺血+缺氧处理;空白对照组(C组)不作处理。各组乳鼠于上述7个不同时间点取血(右侧颈外静脉采血),采用ELISA法检测血清中pNF-H和UCH-L1蛋白表达水平的变化。结果:(1)HIBD组乳鼠各亚组内(不同时间点)比较血清pNF-H和UCH-L1蛋白表达水平差异均有统计学意义(P<0.01),而对照组(假手术组及空白对照组)乳鼠不同时间点血清pNF-H和UCH-L1蛋白表达水平差异均无明显统计学意义(P>0.05);(2)各时间点HIBD组乳鼠血清中pNF-H和UCH-L1蛋白浓度较对照组(假手术组和空白对照组)同一时间点显著升高(P<0.01),而各时间点对照组组间两两比较,乳鼠血清pNF-H和UCH-L1蛋白浓度差异无明显统计学意义(P>0.05);(3)结果显示,HIBD组乳鼠在缺氧缺血处理后6h血清pNF-H和UCH-L1蛋白浓度均明显升高,其中UCH-L1蛋白约48h到达峰值水平,pNF-H蛋白浓度于72h到达峰值,随后出现下降趋势,7d后HIBD组血清pNF-H及UCH-L1蛋白明显下降趋于正常水平。结论:血清中pNF-H和UCH-L1蛋白表达水平在HIBD早期显著升高,可能作为潜在生物标志物用于帮助新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的早期诊断,将有助于识别需要亚低温治疗和需要其他新的神经保护性干预措施的新生儿,并且有助于评估其临床疗效,从而降低HIE致死率及伤残率。
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