RPW8.2是从拟南芥生态型MS-0中克隆得到的一个对白粉病菌具有广谱抗性的基因,编码一个由跨膜锚定结构域和CC结构域构成的抗性蛋白。RPW8.2的表达受白粉菌侵染诱导,其蛋白特异锚定于吸器外质膜（extra-haustorial membrane,EHM）上,运输到EHM的过程依赖于细胞骨架和自身两个富含精氨酸和赖氨酸的保守元件（R/K-R/K-x-R/K）。RPW8.2所介导的抗性反应包括SA的积累、PR基因的升高、H2O2的积累、胼胝质的沉积和HR反应,但其产生抗性的机制依然没有明确。通过对RPW8.2氨基酸序列的预测发现一个核定位信号。为了验证预测的核定位信号,首先使用经典的核定位信号NLSSV40融合单个红色荧光报告基因在烟草中瞬时表达检验该系统的可行性。发现融合蛋白RFP-NLSSV40由于分子量太小可以通过自由扩散的方式穿梭于核质之间,所以其亚细胞定位结果与RFP一样在细胞核与细胞质中均有荧光。为了让报告基因系统表达的融合蛋白分子量高于核孔复合物被动运输所需的大小,我们采用含有两个串联的荧光报告基因的载体来验证核质穿梭相关信号。试验证实融合蛋白2×RFP-NLSSV40完全定位于细胞核中,说明该系统可以有效的验证核质穿梭相关信号。通过该报告基因系统,成功的验证了RPW8.2中功能很强的核定位信号92-99aa。根据核质穿梭相关信号长度较短的特点,将RPW8.2分成8个相邻重叠20个氨基酸的片段用于筛查RPW8.2中所含的核质穿梭相关信号。最终发现RPW8.2还含有三个核输出信号（1-60aa,121-140aa和141-169aa）和一个核定位信号（65-74aa）,同时也发现RPW8.2的降解依赖于蛋白酶体途径。通过融合外源核质穿梭相关信号将RPW8.2特异的定位于细胞核或细胞质中研究其在不同空间的功能,结果发现RPW8.2在细胞核中启动抗性,在细胞质中诱导细胞死亡。以RPW8.2中核质穿梭相关信号为节点,分别从N端或C端进行截短,在烟草中瞬时表达筛选决定RPW8.2诱导细胞死亡功能的片段。发现C末端只能在细胞质内诱导细胞死亡,其核心元件是111-174aa,143-174aa是决定RPW8.2 C末端诱导细胞死亡的关键氨基酸,1-60aa和两个决定RPW8.2定位于吸器的元件（20-25aa和91-100aa）是抑制细胞死亡的元件,61-81aa之间含有促进细胞死亡的元件。RPW8.2 C末端通过促进叶绿体降解的方式启动细胞死亡,衰老相关基因AtWRKY53、AtSAG13、AtRPS17和AtRBCS参与这一过程并调节RPW8.2的抗性反应。通过本研究发现,RPW8.2拥有多个核质穿梭相关信号,严格调控其在细胞核和细胞质间的穿梭,分别在细胞核中启动抗性和在细胞质中产生细胞死亡,这为进一步深入研究RPW8.2的功能提供了新的方向。衰老相关基因参与调控RPW8.2的抗性反应,这也为阐明HR反应的机制提供了新的思路。