【摘 要】
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目的及内容:该实验作为隐丹参酮Ⅰ类新药开发的一部分,目的在于建立检测动物体内隐丹参酮浓度的方法,并运用该方法研究大鼠口服隐丹参酮纯品及不同隐丹参酮制剂的药代动力学
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目的及内容:该实验作为隐丹参酮Ⅰ类新药开发的一部分,目的在于建立检测动物体内隐丹参酮浓度的方法,并运用该方法研究大鼠口服隐丹参酮纯品及不同隐丹参酮制剂的药代动力学行为,为药物的临床前研究提供实验数据.实验分为四个部分:(1)建立检验大鼠生物样本隐丹参酮浓度的快速、灵敏、稳定性好的HPLC法;(2)大鼠口服隐丹参酮的相对生物利用度的研究;(3)几种隐丹参酮制剂的筛选;(4)大鼠口服低、中、高三个剂量隐丹参酮的药时曲线.3.方法:HPLC法以氟西汀(fluoxetine FXT)为内标,依利特C18色谱柱(4.6×150mm,5 μ m)作为固定相,流动相为72％的甲醇,28%的硼酸/氯化钾缓冲液(PH=9.4),流速1.2ml/min,紫外检测波长270nm.取大鼠血浆或组织匀浆,按比例加入2.0mg/ml vitC溶液以抗氧化,加入内标涡旋后,加入三倍体积乙醚,静置后离心,吸取上清液.室温下真空挥干,甲醇水溶液溶解残渣,去蛋白处理后进样.选用SD大鼠进行隐丹参酮纯品的相对生物利用度研究,大鼠分别腹腔注射及口服隐丹参酮纯品后于不同时间点从尾尖采血,通过比较药代动力学参数探讨隐丹参酮纯品在大鼠体内是否存在吸收;接着用同样的方法进行了3种隐丹参酮制剂的筛选,最后筛选出吸收最佳的制剂(2＃)进行大鼠口服三个剂量组隐丹参酮制剂的实验.SD大鼠于实验前一天乙醚麻醉,行右侧颈静脉插管手术,禁食12小时后于次日按低、中、高三个剂量组口服给药,给药后不同时间点由右颈静脉插管取血.每次取血后立即于插管处补充与取血量相当的肝素生理盐水或新鲜血液.采集的血样置于肝素化EP管中加入一定量的抗氧化剂,分离血浆,-20℃保存至处理.结论:该实验建立了一种良好的HPLC方法用于测定大鼠生物样本中隐丹参酮的浓度,该分析方法灵敏准确、重复性好、可信性高、简便且易于推广,能满足药物在大鼠体内的药代动力学的研究.隐丹参酮纯品口服给药在体内存在吸收但生物利用度较低且吸收不规则;进行制剂改良后,2＃制剂的体内吸收最优.大鼠口服2＃制剂的血浆药物浓度-时间曲线呈双峰特征;隐丹参酮2＃制剂在大鼠体内30-300 mg/Kg的剂量范围内呈线性特征.
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