尿有机酸检测在新生儿缺氧缺血性脑病早期诊断中的意义

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目的:探讨尿液有机酸变化在足月新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)早期诊断中的价值。方法:2018年8月至2018年12月中国人民解放军联勤保障部队九00医院儿科新生儿重症监护病房(NICU)收治的8例足月HIE患儿(HIE组,标记U1~U8)和10例健康足月新生儿(对照组,标记N1~N10)作为研究对象。无菌集尿袋收集生后0~24h、24~48h、48~72h的尿液3~5ml,对照组只收集生后0~24h的尿液3~5ml。运用气相色谱串联质谱法(GC-MS)测定尿中132种有机酸值;运用独立样本t检验比较两组新生儿之间和HIE组不同时间点之间尿液有机酸值的差异;采用非监督性主要成分分析法(PCA)对比分析两组新生儿尿液中主要有机酸成分的差异;通过热图(Heatmap)描述性分析两组新生儿尿液中部分有机酸成分的差异;配对选取(U7配N1)1例HIE组患儿和1例对照组新生儿0~24h内尿液进行质谱图比较。结果:HIE组0~24h和24~48h尿有机酸总量明显高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01),48~72h略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);HIE组尿有机酸总量随时间推移逐渐降低,0~24h高于24~48h,24~48h高于48~72h,48~72h尿有机酸总量明显低于0~24h,差异有统计学意义(P<0.01)。在检测的132种尿有机酸中,两组新生儿尿液中乳酸、草酸-2、乙醛酸-OX-2等24种有机酸值有统计学差异(P<0.05或0.01),HIE组0~24h和24~48h以上24种有机酸值大多数高于对照组,48~72h接近对照组;HIE组以上24种尿有机酸值随时间推移逐渐降低,0~24h高于24~48h,24~48h高于48~72h。PCA对比分析主成分1(PC1)与主成分2(PC2)及PC1与主成分3(PC3),均显示HIE组0~24h和24~48h的主成分与对照组分离明显,48~72h与对照组分离不明显;HIE组主成分随时间推移发生差异性变化。对有差异的24种有机酸进一步行热图比较,经聚类分析显示为高丰度值的是柠檬酸、高香草酸-2、棕榈酸-1、2-酮戊二酸-OX-2、丙酮酸-OX-2、乌头酸-3,其在颜色梯度上表现为红色,以上6种有机酸比较,对照组颜色梯度普遍绿色(监测指标为低丰度),HIE组0~24h和24~48h颜色梯度普遍红色(监测指标为高丰度),48~72h颜色梯度接近于对照组。有机酸质谱图的配对比较显示HIE患儿总质谱图的丰度和响度值明显高于对照组,HIE患儿棕榈酸-1和乌头酸-3的质谱丰度和响度值明显高于对照组。结论:1.HIE患儿生后24h内尿液中有机酸含量明显升高,之后逐渐恢复。2.早期检测尿液中有机酸的变化,可能为早期预测和干预HIE提供辅助依据。3.早期尿液中枸橼酸-4、高香草酸-2、棕榈酸-1、2-酮戊二酸-OX-2、丙酮酸-OX-2、乌头酸-3等有机酸的升高,可能作为预测新生儿窒息后是否发生HIE的辅助指标。
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