瓜蒌薤白白酒汤通过NO3--NO2--NO通路保护小鼠缺血心肌的研究

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目的:研究瓜蒌薤白白酒汤通过NO3--NO2--NO通路保护小鼠缺血心肌的作用机制。方法:将300只C57BL/6J小鼠利用随机数字表法随机分为假手术组(开胸,不结扎冠状动脉);阴性对照组(灌服生理盐水);瓜蒌薤白白酒低剂量组(50mg/只/天);瓜蒌薤白白酒中剂量组(100mg/只/天);瓜蒌薤白白酒高剂量组(200mg/只/天)5组,每组60只。除假手术组外,其余各组采用结扎左冠状动脉前降支建立心肌缺血模型,以20mg/kg腹腔注射L-NAME抑制小鼠体内e NOS蛋白的表达。各组小鼠在造模前1周开始给药,待造模成功后每组取30只小鼠继续给药4周,另外的每组30只小鼠于造模第2天取血清,采用酶联免疫吸附法测定小鼠血清中肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;采用Griess法检测瓜蒌、薤白、白酒及其组方中NO3-/NO2-含量;小动物生理监测系统检测小鼠心电图变化;Western blot检测心肌组织e NOS蛋白的表达;采用总NO试剂盒检测血清中总NO的含量;心脏切片经HE染色法检测小鼠心肌病理损伤情况,经2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色后测定心脏梗死面积。结果:瓜蒌NO3-水平含量较高、薤白NO3-水平含量次之,白酒NO3-含量极少;三者NO2-的含量均较低;心肌缺血小鼠的心电图ST段呈弓背向上抬高;腹腔注射L-NAME小鼠的心肌组织中e NOS表达明显受抑制;与阴性对照组比较,瓜蒌薤白白酒汤各组小鼠血清中的NO水平具有呈剂量依赖性升高的趋势(p<0.05);瓜蒌薤白白酒汤各组小鼠血清中cTnT、CK-MB、LDH水平具有呈剂量依赖性降低的趋势(p<0.05);瓜蒌薤白白酒汤各组小鼠心肌梗死面积呈剂量依赖性降低的趋势(p<0.05);同时该方具有明显改善小鼠心肌病理损伤程度的作用。结论:在缺氧条件下,当L-Arginine-e NOS-NO经典通路被抑制后,瓜蒌薤白白酒汤可通过NO3--NO2--NO通路产生大量的NO,对缺血梗死心肌起到有效的保护作用。
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