山杏花黄酮及挥发性物质的研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaoyangfei1
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本课题以山杏花为原料,对山杏花总黄酮的提取、分离纯化、活性测定、初步结构测定进行了研究。同时,利用同时蒸馏萃取法提取了山杏花不同花期(花蕾期、盛开期和衰花期)的挥发性物质,并利用气相色谱质谱联用法进行分析测定。具体实验内容如下:1.闪式提取山杏花总黄酮的工艺优化。以山杏花总黄酮的提取得率为指标,利用单因素试验和响应面试验对闪式提取的影响因素进行优化。结果表明最佳工艺条件为:液料比(mL/g)100:1,乙醇体积分数76%,闪提温度67℃,闪提时间5 min,在此条件下提取得率为144.68 mg/g,与模型最优化的理论值的相对误差为0.02%。说明响应面优化的最佳提取工艺参数可靠,具有实际应用价值。2.大孔树脂分离山杏花总黄酮的工艺优化。经过筛选使用X-5型大孔树脂对山杏花总黄酮进行分离。通过单因素试验和正交试验优化得到最佳分离工艺条件为:上样液流速1.0 mL/min、pH值为2、上样液浓度0.7 mg/mL;5倍柱体积水洗和5倍柱体积的95%乙醇溶液洗脱,洗脱流速2.0 mL/min。此条件下,吸附率为93.46%,回收率为88.15%。山杏花总黄酮的纯度可由粗提物的30.18%提高到93.12%。3.山杏花总黄酮结构的初步定性分析。将大孔树脂分离后的山杏花总黄酮经乙酸乙酯萃取后,利用Sephadex LH-20进一步分离纯化,并用高效液相色谱法进行分析。利用高效液相色谱质谱联用法对乙酸乙酯萃取后的黄酮类物质进行初步的定性分析,结果表明其中可能含有芦丁和多酚类物质绿原酸。4.山杏花总黄酮的活性测定。通过测定大孔树脂分离前后山杏花总黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)和羟基自由基的清除能力,总还原能力和总抗氧化能力,评价了其抗氧化活性;以Vc和β-熊果苷为阳性对照,通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,研究了分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶活性的抑制能力。结果表明,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且分离后抗氧化活性得到明显提高;分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶的抑制能力均强于β-熊果苷弱于Vc,其IC50值分别为2.24、3.08mg/mL。5.山杏花总黄酮对果蝇抗衰老作用的研究。结果表明:0.1、0.5 mg/mL山杏花总黄酮可以极显著延长果蝇的平均寿命及最高寿命(p<0.01),并且显著提高果蝇体内过氧化氢酶活力(p<0.05),超氧化物歧化酶活力(p<0.01),极显著降低丙二醛含量(p<0.01);0.1、0.5 mg/mL山杏花总黄酮可以有效抵抗双氧水和百草枯引起的急性氧化应激性损伤。6.山杏花不同花期挥发油成分分析。结果表明:三个花期检测出醛类(11种),酮类(4种),酯类(4种),醇类(4种),烷烃(4种)和其他类(1种)共28种挥发性成分。醛类物质是山杏花挥发油的重要组成成分,随着花的开放,其含量呈现先升后降的趋势,其中苯甲醛含量最高,达到80-90%。苯甲醛、壬醛、茶香酮、苯甲醇、芳樟醇、辛烷、二十一烷和二十八烷是山杏花特有香气成分。
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