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目的:通过体外、体内实验探究三种不同浓度的丝素蛋白多孔支架的物理性能、降解特性、细胞相容性及组织相容性,评估和探讨其用于口腔软组织增厚的可行性。方法:采用冷冻干燥法制备出SF1(1wt%)、SF3(3wt%)、SF5(5wt%)三种不同浓度的丝素蛋白多孔支架。1、通过扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)、傅里叶转换红外光谱分析(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、X射线衍射测试(X-ray diffraction,XRD)以及差示扫描量热分析(Differential scanning calorimetry,DSC)对材料的表征及二级结构进行分析,并测定各组支架的孔径大小、孔隙率及体外降解速率;2、将人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)接种于三种支架材料上,共培养第3天与第5天,采用细胞增殖活性检测试剂盒(Cell counting kit,CCK-8)评估培养周期内支架对HGFs增殖活性的影响,对比各组支架上HGFs的相对细胞活性;3、将三组支架材料分别植入新西兰大白兔口腔黏膜下,3个月后观察术区大体形态,测量和对比术前、术后各组黏膜厚度的变化,评估各组材料对兔口腔黏膜的增厚效果;取术区标本,制作病理切片,采用HE、Masson染色观察材料的降解情况、炎症反应、新生血管及新生胶原纤维,对比和分析各组丝素蛋白支架的组织相容性。结果:1、SEM结果显示三种材料均具备相互连通的多孔结构,孔径大小分别为80.61±30.63μm(SF1)、133.40±22.85μm(SF3)、34.88±15.96μm(SF5),FTIR、XRD、DSC测试结果显示SF1、SF3、SF5二级结构相似,主要构象均为SilkⅡ型;测得孔隙率分别为95.13±4.12%(SF1)、90.05±6.68%(SF3)、86.85±5.43%(SF5);浸泡于含链蛋白酶(1UmL-1)的PBS中24小时后三种支架材料分别剩余83.55%(SF1)、88.63%(SF3)、91.84%(SF5)的质量;2、CCK-8结果显示共培养第3天至第5天,各组支架上的HGFs呈现出增殖趋势,支架上HGFs相对细胞活性:SF1>SF3>SF5(P<0.05);3、与术前(T0)相比,各组支架材料植入3个月后(T2),植入部位均显示出了黏膜厚度的增加(P<0.05),增厚效果:SF1
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