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猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)在裂解酶的作用下能够形成4种结构蛋白和8种非结构蛋白。其中,囊膜糖蛋白E2蛋白是免疫优势蛋白,能诱导机体产生中和性抗体,保护动物免受猪瘟感染。对E2蛋白的深入研究发现,A、B、C、D区域是E2基因中的主要抗原区,对含有A、B、C、D区域的E2主要抗原区的表达纯化对猪瘟疾病的研究和检测具有重要研究意义和应用价值。本研究利用原核表达系统对E2蛋白中含有A、B、C、D区域的主要抗原区基因(531bp)进行表达,将E2抗原区基因与PET-28a-SUMO表达载体连接,构建表达载体PET-28a-SUMO-E2。用SUMO作为促溶标签增加蛋白的可溶性,,设置诱导温度37℃、28℃、16℃和IPTG浓度0.1、0.3、0.5、0.7、1 mmol/L,进行优化。结果显示,目的蛋白SUMO-E2在低温条件16℃时以可溶性形式表达,在IPTG浓度为0.7 mmol/L时,可溶性蛋白的表达量最多。经镍柱二次亲和层析后,得到浓度为0.7 mg/mL的目的蛋白。Western-blot分析和ELISA试验证明可溶性E2蛋白具有良好的反应原性,可以作为抗原应用于猪瘟抗体检测。E2蛋白的获得为后期猪瘟血清学检测方法的建立奠定基础。