【摘 要】
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我国是世界上番茄种植面积最大、产量最多的国家。近年来土传病害危害日趋严重,已成为番茄可持续生产的瓶颈。其中,番茄枯萎病(Fusarium wilt of tomato)是由尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici,FOL)引起的一种土传病害,严重影响番茄产量和品质。生物有机肥包含特定功能微生物,与有机物质结合能够起到防病促生的作用,对农药减量控害
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金(31601661); 山东省重点研发计划(2018GSF121005); 山东省自然科学基金(ZR2018PC018)
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我国是世界上番茄种植面积最大、产量最多的国家。近年来土传病害危害日趋严重,已成为番茄可持续生产的瓶颈。其中,番茄枯萎病(Fusarium wilt of tomato)是由尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici,FOL)引起的一种土传病害,严重影响番茄产量和品质。生物有机肥包含特定功能微生物,与有机物质结合能够起到防病促生的作用,对农药减量控害及化肥减量增效具有重要意义。本研究采用实验室分离获得的一株具有广谱拮抗活性的甲基营养型芽孢杆菌TA-1,在明确TA-1对番茄枯萎病的室内拮抗活性基础上,通过响应面法优化了TA-1液体发酵条件,将TA-1发酵液与腐植酸混合制成TA-1生物有机肥,研究该生物有机肥在温室条件下对番茄枯萎病的防治效果及其对土壤理化和微生物的影响。此外,还建立了番茄枯萎病实时荧光定量PCR检测体系,以期为该病的预测和早期防治提供依据。主要研究结果总结如下:1.室内拮抗活性研究发现TA-1菌体和无菌发酵液对番茄枯萎病病原菌具有较强的拮抗作用,其脂肽粗提物对番茄枯萎病病原菌的EC50为106.14 mg·L-1。2.响应面法研究发现适宜TA-1生长的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为牛肉膏,最佳无机盐为Ca Cl2,当培养条件为葡萄糖30 g·L-1,牛肉膏20 g·L-1,Ca Cl25 g·L-1,转速211.55 rpm,温度30.54℃,发酵时间48 h,装液量90 m L/250 m L,接种量5.03%时,预测TA-1液体发酵活菌数为9.13×10~8 CFU·m L-1。使用平板菌落计数法对优化后的培养条件进行验证,测得活菌数为9.80×10~8 CFU·m L-1,活菌数是优化前的2.94倍。将TA-1发酵液与腐植酸混合、造粒、进行烘干,制备成为TA-1生物有机肥,其中TA-1活菌数稳定在3×10~8CFU·g-1以上。3.温室盆栽试验结果表明穴施12 g/株TA-1生物有机肥(3×10~8CFU·g-1)对番茄枯萎病的防效为66.67%,并且显著提高了番茄的株高、茎粗、地上部鲜重和地上部干重。施用TA-1生物有机肥能够减少铵态氮含量,增加硝态氮含量,提高土壤中过氧化氢酶、脲酶和磷酸酶的活性,促进番茄根际土中细菌和芽孢杆菌数量的增加,减少真菌和尖孢镰刀菌的数量。对番茄茎基部番茄枯萎病菌拷贝数检测显示,TA-1生物有机肥能够有效抑番茄枯萎病菌在番茄维管束的侵染。4.番茄枯萎病菌的实时荧光定量PCR检测结果表明,人工接种番茄枯萎病菌后,番茄定植后7 d即可在茎基部检测到病原菌,从而能够为番茄枯萎病的流行监测和早期防控提供科学依据。
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