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前言精神分裂症(schizophrenia, SP)为一组病因不明的疾病,临床表现以思维过程松散,不合逻辑的联想,荒谬的妄想,情感不恰当或平淡和社会功能缺损为主要症状。SP是法医学鉴定的重要内容之一。除一定的环境因素影响外,SP发病的素质缺陷——遗传学因素也得到了明确的证实。色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase, TPH)是5-HT合成的限速酶,催化色氨酸生成5-羟色氨酸。由444个氨基酸组成,它主要分布于大脑和肠嗜铬细胞。此酶特异性高,含量少,活性低,TPH的生理活性和表达水平的正常与否影响着5-HT的合成量,增强或减弱5-HT及其代谢物的作用强度,进而影响它在中枢神经系统的功能现已发现两种TPH：即TPHl与TPH2。TPH1由444个氨基酸组成。只在仅有的几种特殊的组织中表达,在中枢神经系统(CNS),脑干脊髓神经元以及松果体细胞中亦有分布。对此酶的研究分析可以对人们进行某些精神状态的估计,有利于认定人们所处于何种精神状态,因此可被视为一些精神紊乱病症的候选基因。本研究拟调查TPH1基因-1067G／A、-347T／G位点在中国北方汉族及精神分裂症群体中的遗传多态性,探讨其法医学应用价值及在精神分裂症诊断中的参考意义。材料与方法212例(男95例,女117例)中国北方汉族无血缘关系健康个体肘静脉血液样品,由中国医科大学法医学院提供,经问卷调查三代之内无精神疾患家族史；191例(男性92例,女性99例)汉族SP患者血液样品,由中国医科大学法医学院提供,采自开原市精神病院,其中按疾病亚型分类偏执型精神分裂症患者95例,未定型精神分裂症患者88例。患者诊断标准符合美国精神病学会《精神障碍诊断和统计手册》第4版(DSM-Ⅳ)和《中国精神障碍分类与诊断标准》第3版(CCMD3)。通过基因组DNA提取,根据目标序列自行设计引物,应用PCR限制性片段长度多态性(PCR restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)法结合聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测TPH1基因-1067G／A、-347T／G遗传多态性,通过PAGE分离DNA片段结合银染显谱的方法进行分型,计算相关法医学数据并进行病例对照研究。结果1、212例中国北方汉族个体、191例SP个体基因型经吻合度检验法,均符合Hardy-Weinberg平衡定律。2、在212例中国北方汉族个体中,TPH1启动子区-1067G／A,-347T／G位点紧密连锁,共检出三种基因型和两种单倍型：纯合型AA-GG为143例,频率为0.6745；杂合型AG-GT为63例,频率为0.2972；纯合型GG-TT为6例,频率为0.0283。单倍型A-G的频率为0.8231,单倍型G-T的频率为0.1768。3、在191例SP患者中,AA-GG为171例,频率为0.9000；AG-GT为18例,频率为0.0947；GG-TT为1例,频率为0.0053。4、SP患者与对照组之间比较,单倍型频率分布差异在各组之间P<0.05。将各人群按性别分组,SP按临床亚型分组在做比较可见：SP患者男性与对照组单倍型频率相比较,P<0.05。SP患者女性与对照组单倍型频率相比较,P<0.05。偏执型SP患者与对照组单倍型频率相比较P<0.05。未定型SP患者与对照组单倍型频率相比较,P<0.05。5、TPH1基因-1067G／A,-347T／G多态性位点在中国北方汉族中,其DP值为0.4559,H值为0.2972,PE值为0.1244,PIC值为0.2489。讨论1、本研究调查了TPH1基因启动子区-1067G／A,-347T／G多态性位点在中国北方汉族健康群体与SP患者中的频率分布,经过统计学分析,结果表明单倍型A-G在SP患者中的分布明显高于对照组。单倍型A-G可能是SP的危险因素,-347T／G多态性位点序列变异可能通过改变TPH酶的组织特异性表达从而影响5羟色胺的生物合成。2、根据TPH1启动子区-1067G／A,-347T／G多态性位点在中国北方汉族中,单倍型频率和基因型频率分别计算得出：该单倍型位点DP值为0.4559,H值为0.2972,PE值为0.1244,PIC值为0.2489。该位点属于具有中等鉴别能力的遗传标记系统,在法医学个人识别和亲子鉴定中具有一定的应用价值。3、TPH1启动子区-1067G／A,-347T／G位点的遗传多态性具有民族和地域差异。结论1、TPH1基因-1067G／A与-347T／G多态性位点可能与SP有关；单倍型AG可能是精神分裂症发病的易感单倍型。2、TPH1启动子区-1067G／A位点中的A等位基因与-347T／G中的G等位基因在遗传是紧密连锁；-1067G／A位点中的G等位基因与-347T／G中的T等位基因在遗传上是紧密连锁的。3、TPH1基因-1067G／A与-347T／G多态性位点的遗传多态性存在民族或地域性差异。4、TPH1启动子区-1067G／A与-347T／G位点在中国北方汉族群体中具有较好的遗传多态性分布,在法医学个人识别和亲子鉴定中可具有一定的应用价值。