聚苯乙烯微球在蛋白质芯片上的构筑及性能表征

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaobailove2009
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本文通过改变反应条件制备尺寸可控的单分散聚苯乙烯微球(PS),并利用Langmiur-Blogget(LB)技术对其在玻片上进行组装,制备成一种新型的具有高固定率的蛋白质芯片玻璃载体,通过进一步修饰纳米金粒子和酸化银溶胶,用表面增强拉曼散射技术(Surface-enhancement Raman Scattering,SERS)检测其高灵敏度。研究了以苯乙烯为单体采用分散聚合法制备尺寸可控的单分散聚苯乙烯微球的制备工艺,分析了乳化剂、引发剂、单体的用量、醇水比和搅拌速度对产物粒径分布的影响。表征结果表明,用分散聚合方法可制备出粒径为100~800 nm的聚苯乙烯微球粒径均匀且呈单分散。荧光光谱测试结果表明,聚苯乙烯微球的荧光激发峰在390 nm处,与微球粒径大小无关。借助LB技术对PS微球在载玻片上进行了 自自组装预处理。预处理后的玻片经过有机硅烷的进一步修饰,干燥后制备成一种蛋白质芯片玻璃载体。利用有机硅烷与蛋白质的共价牢固结合和PS微球的三维表面增大玻片比表面积的优势,该蛋白质芯片玻璃载体蛋白质固定率高,高达96%;信噪比高,可达2.98;芯片与蛋白质的结合牢固。为了提高此种蛋白质芯片的检测灵敏度,对蛋白质基底进行了改进,通过纳米金修饰PS微球形成一种复合材料,组装后作为基底对羊抗兔IgG进行拉曼表征。由拉曼光谱可知,PS的拉曼峰强很高,使得IgG的峰强明显很弱,修饰纳米金粒子之后,IgG的拉曼峰强有所增强,但是增强幅度不是很大。为了消除芯片基底的拉曼信号干扰,加入酸化银溶胶,形成金-蛋白质-银三明治结构,结果表明,加入酸化银溶胶之后,IgG的拉曼信号得到了明显的增强,通过计算比较峰强和峰面积,增强了 2个数量级左右。而且,值得注意的是,加入酸化银溶胶后,只有IgG的拉曼信号的到了增强,而PS的拉曼峰在拉曼图谱上没有显示,这就说明了银粒了只增强蛋白质信号,掩盖芯片基底信号。对此芯片检测限进行了研究分析,最低检测限可达0.25 ng/L。使用Au@PS纳米复合材料作为拉曼探针,次甲基蓝作为拉曼信号表达物,对Au@PS的表面增强拉曼散射活性进行了研究,结果显示,吸附在Au@PS上的次甲基蓝分子的拉曼散射信号得到增强。本文还对PS膜和Au@PS膜进行了光学的分析与比较。结果表明,在纳米金修饰之后,荧光强度明显降低,这是由纳米金粒子的荧光猝灭效应所导致的。
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