中药复方总多糖对小鼠免疫功能的影响及小鼠相关差异基因的筛选

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天然中草药是我国传统医学的瑰宝,其有效成分主要有:多糖、生物碱、甙类、油脂等生物活性物质。其中多糖(Polysaccharide)广泛存在于动物、植物和微生物细胞中,是构成生命的基本物质之一,参与细胞各种生命活动的调节。自上世纪70年代以来,由于中药多糖显著免疫活性的发现,使得多糖成为中药药理学尤其是免疫药理学的研究热点,相关研究陆续见报道。到目前为止,国内就已经对一百多种中药多糖进行了深入研究。研究表明,中药多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血糖、降血脂、保肝等多种功能,其中免疫调节活性倍受关注,是中药多糖研究的中心课题。 本试验从自拟中药复方中提取总多糖成分,研究其对小鼠免疫功能的调节作用,并初步筛选口服多糖后小鼠发生差异表达的片段。给予小鼠口服中药复方总多糖,以复方水煎剂、黄芪多糖、生理盐水做对照,7天后,进行淋巴细胞转化试验,腹腔巨噬细胞吞噬试验,EA花环形成试验,并保留其脾脏,运用mRNA差异显示技术初步筛选中药多糖作用相关基因cDNA片段,试验结果如下: 1 此复方总多糖能显著提高正常小鼠的特异性免疫和非特异性免疫功能,其功效明显优于水煎剂和黄芪多糖,说明总多糖是该中药复方提高机体免疫功能的主效成分,同时亦可推断各单味中药多糖在免疫调节过程中具有协同促进作用。 2 本试验中复方总多糖能提高腹腔巨噬细胞活性以及Fc受体活性,提示其可能具有抗肿瘤效应,这有待在今后的试验中证实。 3 利用mRNA差异显示方法筛选出小鼠3条差异表达的cDNA片段,经克隆、测序及序列分析,结果发现LY3与Mus musculus BAC clone RP23-20E4 from chromosome 3同源性达99%,L2与Mus musculus BAC clone RP23-339H16 from 15同源性达92%,L3与Mus musculus chromosome 7,cloneRP24-371C6同源性达98%,提示这三个差异表达片段可能与中药多糖的免疫调节功能相关。 4 mRNA差异显示技术可简捷、快速地筛选出口服中药复方总多糖、黄芪多糖后小鼠差异表达的基因,为今后多糖作用的研究奠定了基础。
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