【摘 要】
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对实验室已筛选的在烟草瞬时表达系统中能引起烟草细胞程序性死亡9个分泌蛋白进行分析,结果发现其中两个假定的分泌蛋白(MoCFEM1,MoCFEM2)含有CFEM(Common in Fungal Extrace
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对实验室已筛选的在烟草瞬时表达系统中能引起烟草细胞程序性死亡9个分泌蛋白进行分析,结果发现其中两个假定的分泌蛋白(MoCFEM1,MoCFEM2)含有CFEM(Common in Fungal Extracellular Membrane proteins)结构域。生物信息学分析表明,稻瘟病菌全基因组中含有该结构域的蛋白均为富含8个半胱氨酸的分泌蛋白或者跨膜蛋白。水稻和稻瘟病菌的互作过程涉及两者间细胞组分、分子信号的识别和交换。含有CFEM结构域蛋白可能是在寄主与病原体互作中可能作为细胞表面受体,信号传感器,或粘附分子,从而影响稻瘟病菌的致病性。通过全基因组比较在稻瘟病菌中鉴定到了 19个含有CFEM结构域的基因(包含MoCFEW1,MoC EM2),在剩余的17个基因中成功克隆得到8个MoCFEMs基因,采用农杆菌介导的烟草瞬时表达体系,发现另外2个CFEM基因(MoCFEM3,MoCFEM4)也能够诱导植物细胞程序性死亡。为探究MoCFEMs在稻瘟病菌中的功能,我们在稻瘟病菌野生型菌株Guy1 1中对4个能诱导植物细胞程序性死亡的基因进行敲除和过表达,获得了MoCFEM1、MoCFEM2、MoCFEM3、MoCFEM4基因的敲除突变体和过表达菌株,表型分析结果表明MoCFEM1基因的敲除突变体生长速率明显下降,将该基因重新导入敲除突变体中可以恢复该表型缺陷。但其致病性与野生型相比并无明显变化。除MoCFEM3过表达菌株致病性较野生型下降,其余MoCFEM、MoCFEM3M4 敲除突变体及 MoCFEM 1、MoCFEM2、MoCFEM4过表达突变体在生长及致病性上并无明显变化。综上结果,稻瘟病菌CFEM结构域家族中的多个基因在农杆菌介导的烟草瞬时表达体系中可以引起细胞的程序性死亡,对这些基因的敲除和过表达结果表明该家族基因可能在稻瘟病菌生长发育以及与植物互作过程中发挥重要功能。
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