姜汁制香薷特色炮制机理研究

来源 :江西中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gang098
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[目的]建立江香薷药材HPLC指纹图谱及7种含量测定,为江香薷作为江西道地药材提供一定的科学依据;优选生姜汁制、干姜汁制香薷的炮制工艺,传承与发扬古籍中特色炮制工艺;对比生姜汁制、干姜汁制香薷在炮制前后的挥发性成分变化;比较香薷不同炮制方法对小鼠发汗作用的影响,为姜汁制香薷的炮制机制提供参考研究。[方法]1.香薷95%乙醇提取液的分析采用Diamosil C18色谱柱(250 nm×4.6 nm,5μm);乙腈流动相(A)-0.2%磷酸(B),采用梯度程序洗脱;检测波长210nm;流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,进样量10μL。2.采用水蒸气蒸馏法分别提取香薷生品、生姜、干姜以及生姜汁制香薷、干姜汁制香薷中的挥发性成分,采用顶空气相色谱-质谱联用技术进行分析,气相色谱条件为HP-5MS弹性石英毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),载气为氦气,流速1.0 mL·min-1,进样口温度250℃,进样量0.2μL,分流比50:1;升温程序为柱温初始温度40℃,以5℃·min-1升温至60℃,保持2 min,以5℃·min-1升至160℃,保持3 min,以25℃·min-1升至250℃,保持2 min;质谱条件为电子轰击离子源(EI),电子能量70 eV,离子源温度230℃,接口温度280℃,四极杆温度150℃,溶剂无延迟,电子倍增器电压设置为2.188 kV,全扫描模式,扫描范围m/z35550。通过检索比对NIST-11标准质谱图谱库,鉴定样品挥发油中化学成分,并采用Minitab 16及IBM SPSS Statistics 21软件优化并预测姜制香薷的炮制工艺。3.将40只雄性小鼠分成8只一组,利用汗腺上皮组织形态观察法考察香薷生品、生姜汁制香薷、干姜汁制香薷、蒸馏水及阳性药硝酸毛果芸香碱溶液对小鼠发汗的影响,并利用IBM SPSS Statistics 21软件对其进行关联性分析。[结果]1.12个批次的江香薷HPLC指纹图谱中有14个共有峰,相似度均大于0.96。7种成分在各自范围内线性关系良好(R2≥0.9981),平均加样回收率为94.58%95.72%,RSD为1.42%2.06%。2.香薷生品中共检测出27种挥发性成分,辅料生姜中有81种挥发性成分,9种不同炮制条件下的生姜汁制香薷炮制品分别有31,38,29,35,38,33,34,22,26种挥发性成分,生姜汁制香薷最佳炮制工艺为40 g香薷药材经等体积生姜汁闷润6 h后炒制8 min,总挥发油提取量从高到低排序为生姜汁制香薷>生姜>香薷生品。辅料干姜中有78种挥发性成分,9种不同炮制条件下的干姜汁制香薷炮制品分别有37、40、37、50、42、38、36、45、47种挥发性成分,干姜汁制香薷最佳炮制工艺为40 g香薷药材经1.5倍体积干姜汁闷润9 h后炒制8 min,总挥发油提取量从高到低排序为干姜汁制香薷>干姜>香薷生品。3.服药后20min内40只小鼠足跖部肉垫上汗液分布着色点分别为:阳性药硝酸毛果芸香碱组共493个,干姜汁制香薷组共488个,生姜汁制香薷组共439个,香薷生品组共314个,蒸馏水空白组33个;其中阳性药硝酸毛果芸香碱与香薷炮制组无显著性差异,与其他组分均有显著差异,同时干姜汁制香薷与生姜汁制香薷组分也无显著性差异。[结论]1.采用HPLC指纹图谱对香薷进行质量控制的方法准确稳定,重复性好。2.正交设计优选的姜汁制香薷特色炮制工艺科学可靠,加辅料炮制对香薷的挥发性成分有一定影响,干姜汁制香薷的挥发性成分数目多于生姜汁制香薷,经姜汁炮制后的香薷药材在挥发油含量及挥发性成分的数目上均高于香薷生品,为保护和传承古籍中香薷特色炮制方法提供科学依据。3.香薷生品、生姜汁制香薷、干姜汁制香薷均有发汗解表作用,香薷炮制品虽不及阳性药硝酸毛果芸香碱发汗效果,但三者无显著性差异且炮制品优于香薷生品。与香薷传统炮制方法的净制、切制的生品相比,干姜汁炮制及生姜汁炮制后的香薷发汗作用均有显著提高。
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