VEGF-A和Vasohibin-1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

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背景与目的:肿瘤的发生、发展和转移必须依靠新生血管的形成,肿瘤内部大量的新生血管网络为其生长提供养分,并为其血行转移提供通道。因此,丰富的微血管网络系统是恶性实体肿瘤的特征之一,并与其恶性生物学行为密切相关。新生血管的生成取决于血管生成刺激因子与血管生成抑制因子之间的局部平衡,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与血管生成抑制蛋白(Vasohibin-1,VASH-1)作为人体内重要的血管生成调节因子与多种肿瘤的发生和侵袭转移有关。本研究旨在探讨VEGF-A和Vasohibin-1基因在胃癌组织中的表达特点以及与临床病理特征之间的关系。方法:选取2015年6月至2016年6月扬州大学临床医学院(江苏省苏北人民医院)施行手术治疗的52例胃癌病人,术后取胃癌组织和相应的正常组织标本(距切缘>5cm)作为实验组和对照组。所有患者术前均未接受过放疗、化疗或生物治疗等干预措施,术后均经病理证实。肿瘤组织和正常组织各取两分,分别使用液氮及福尔马林固定保存。在液氮低温条件下将组织研磨成粉末状后超低温(-80℃)保存。使用Trizol法将所有标本的总RNA提取,提取出的RNA检测达标后应用反转录试剂盒将总RNA逆转录为cDNA,再以以三磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)作为内参照物应用qRT-PCR(Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction)方法定量检测 Vasohibin-1 和 VEGF-A mRNA 的表达水平。同时将福尔马林溶液保存的组织标本制成石蜡切片,使用免疫组织化学染色法分析VEGF和VASH-1蛋白的表达水平。将VEGF-A和Vasohibin-1表达水平与胃癌患者的临床病理特征进行比较分析。结果:qRT-PCR检测结果示:胃癌组织和对应癌旁组织中的VEGF-A mRNA表达量分别为4.15±1.12、1.14±0.55,VASH-1 mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达量分别为5.69±1.25、1.09±0.49。两者在胃癌组织和对应癌旁组织的表达量均具有统计学差异(P<0.05)。胃癌组织VEGF-A蛋白组织化学染色阴性、阳性、强阳性表达率分别为15.4%(8/52)、44.2%(23/52)、40.4(21/52)%。VASH-1蛋白组织化学染色阴性、阳性、强阳性表达率分别为 19.2%(10/52)、46.2%(24/52)、34.6%(18/52)。胃癌组织中 VEGF-A 阳性表达率为84.6%(44/52),远高于癌旁组织的阳性表达率19.2%(10/52),两者之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中VASH-1阳性表达率为80.8%(42/52),远高于癌旁组织的阳性表达率17.3%(9/52),两者之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中VEGF的表达水平与肿瘤的分化程度、TNM分期及远处转移相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小无关;VASH-1的表达水平与肿瘤的TNM分期及远处转移相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关。结论:1、胃癌组织中的VEGF-A、Vasohibin-1在mRNA和蛋白水平表达均高于癌旁正常组织,且Vasohibin-1表达水平与VEGF-A的表达水平呈正相关。2、VEGF-A和Vasohibin-1和胃癌的发生发展和转移密切相关。3、VEGF-A表达与胃癌的分化程度、TNM分期及远处转移相关。Vasohibin-1表达与胃癌的TNM分期及远处转移相关。
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