胎膜来源的间充质干细胞具有获取方便、对供体无伤害、免疫耐受特性、具有多向分化的潜能、无伦理道德问题等优点，是良好的组织工程、细胞治疗和基因治疗的种子细胞，具有广阔的应用前景。本文以自然分娩的婴儿的胎膜为实验对象，建立胎膜来源的间充质干细胞分离纯化和鉴定方法；考察了在长期传代培养过程中，羊膜和绒毛膜间充质干细胞形态、生长、集落形成能力、表面标志、成骨分化和成脂肪分化能力的变化规律，并根据细胞形态将羊膜间充质干细胞分成3个亚群，研究了不同亚群细胞的形态、表面标志、增殖和分化能力，最后，探索了AICAR对间充质干细胞和成纤维细胞的增殖及分化能力的影响，旨在为胎膜来源间充质干细胞的体外培养和应用提供基础，为进一步揭示研究其增殖和分化机制提供思路。 研究表明经过一系列的酶解作用，1g胎膜间质组织中分离到约106数量级的有核细胞，其中从羊膜和绒毛膜中分离的有核细胞的集落形成率分别为(0.26±0.11)％及(0.11±0.05)‰，均表达CD29、CD44和CD105，不表达CD14、CD34和CD45，并具有多向分化的能力，在体外可向骨、脂肪和软骨细胞分化，经鉴定为羊膜间充质干细胞和绒毛膜间充质干细胞。在长期传代培养过程中，细胞形态随代次的增加变得宽大扁平，增殖能力下降，经过15代的培养，羊膜间充质干细胞可以倍增31次，而绒毛膜间充质干细胞仅为18次，同时伴随着成骨和成脂肪分化能力的降低。在hAMSCs群体中有3种形态特异的亚群，在长期传代过程中，细长梭型的细胞形态均一，具有较强的集落形成能力、增殖能力和成骨及成脂肪分化能力；短小型的细胞形态变化大，增殖能力强，但成骨分化能力弱；宽大扁平型的细胞增殖和成骨分化能力均较弱，但成脂肪分化能力较强。1～2 mM的AICAR能够显著抑制间充质干细胞和成纤维细胞增殖，提高碱性磷酸酶活性，促进细胞的矿化作用，但不影响成脂肪分化；而1 mM的二甲双胍对细胞增殖和成骨分化也无影响。