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目的：初步探讨中期因子(Midkine, MK)的反义寡核苷酸片段(Antisense Oligodeoxynucleotides, ASODN)在5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对绒毛膜癌(choriocarcinoma,绒癌)细胞化疗中的增敏作用,并进一步研究其增敏效应的相关机制。方法：1.化学合成MK-ASODN及相应对照的无义寡核苷酸片段(Nonsense Oligodeoxynucleotides, NSODN),以脂质体为载体转染绒癌JEG-3细胞,并以RT-PCR检测转染效果。2.用MTS比色分析法观察5-FU对MK-ASODN实验组与MK-NSODN对照组绒癌JEG-3细胞的生长抑制情况。3.用Anexin V-FITC双染流式检测凋亡试验观察MK-ASODN实验组和MK-ASODN+5-FU联合实验组以及相应对照组绒癌JEG-3细胞的凋亡情况。4.用Western blot检测MK-ASODN+5-FU联合实验组与相应对照组绒癌JEG-3细胞PI3K/Akt信号通路磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt (p-Akt)及其下游的Bcl-2蛋白水平。结果：1.相比于对照组,转染MK-ASODN后可明显下调MKmRNA表达水平。2.在同样的5-FU浓度下,MK-ASODN实验组绒癌JEG-3细胞的生长抑制率均明显高于其对照组;MK-ASOND下调MK表达能增加绒癌JEG-3细胞对5-Fu的化疗敏感性,与对照组相比,IC50值由54.83±4.86mg/L降为35.69±3.04mg/L(p<0.05)。3. MK-NSODN对照组与MK-ASODN实验组两组绒癌JEG-3细胞总凋亡率分别为0.54±0.10%和0.09±0.03%,其中早期凋亡率分别为0.27±0.09%和0.04±0.01%(p<0.05)；MK-ASODN使5-FU诱导的绒癌JEG-3细胞总凋亡率由28.99±2.04%增加到49.14±4.12%(p<0.05),其中早期凋亡率增加显著,由16.63±2.45%增加38.28±4.41%(p<0.05)；4. MK-ASODN联合5-FU可下调PI3K/Akt活性(p-PI3K,p-Akt)及其下游的Bcl-2的蛋白表达水平。结论：1.绒癌JEG-3细胞转染MK-ASODN后能下调MKmRNA表达。2.MK-ASODN使5-FU作用于绒癌JEG-3细胞的IC50值下降,MK-ASODN能增加5-FU对绒癌JEG-3细胞的凋亡诱导作用,说明MK-ASODN能增加绒癌JEG-3细胞对5-FU的化疗敏感性。3. MK-ASODN对绒癌JEG-3细胞5-FU的化疗增敏作用,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路实现的。关键词中期因子,绒毛膜癌,化疗敏感性,PI3K/Akt信号通路