RNA干扰survivin基因表达对肝癌细胞放射敏感性影响

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目的:探讨RNA干扰survivin基因表达对肝癌细胞放射敏感性的影响。方法:构建针对人肝癌HepG2细胞survivin基因靶序列的shRNA真核表达载体pshRNA-survivin-387。设置空白对照组(不加载体)、阴性对照组(加入pshRNA-survivin-NC)及siRNA转染组(加入pshRNA-survivin-387),用脂质体2000转染HepG2细胞,采用逆转录聚合酶链反应技术检测各组survivin基因mRNA表达水平。分别设置空白对照组、阴性对照组、siRNA转染组、X线照射组、siRNA+X线照射组,收集各组细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法测定细胞存活分数。结果:siRNA转染组survivin基因mRNA表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组,差异有显著性(F=218.93, q=17.73、18.66,P<0.05)。siRNA转染+X线照射组细胞凋亡率明显高于其他各组,差异有显著性(F=1421.83, q=13.81~57.48, P<0.05);siRNA转染组及X线照射组与空白组、阴性组比较,细胞凋亡率也明显提高(q=17.55~39.1, P<0.05)。siRNA转染+X线照射组细胞存活分数显著低于其他各组(F=2870.58, q=15.32~72.51, P<0.05); siRNA转染组及单纯X线照射组细胞存活分数与空白对照组、阴性对照组比较也明显降低(q=11.14~73.9,P<0.05)。结论:pshRNA-survivin387转染能抑制survivin基因表达,诱导肝癌细胞凋亡增强肝癌细胞的放射敏感性。
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