【摘 要】
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脂类代谢与人类某些疾病密切相关,因此了解调控脂类代谢的机理对人体健康有重要意义。GH激活靶组织表面受体,通过复杂的受体信号网络调控机体的脂肪沉积,因此研究GH对机体脂质代谢的调控机理,对防止由脂肪沉积和肥胖引起的疾病非常重要。SOCS蛋白家族对GH信号通路中有重要调控作用,其中SOCS2与GH诱导的JAK/STAT信号通路关系犹为密切。猪的生理生化特点和遗传性能与人具有高度的相似性,是研究人类肥胖
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脂类代谢与人类某些疾病密切相关,因此了解调控脂类代谢的机理对人体健康有重要意义。GH激活靶组织表面受体,通过复杂的受体信号网络调控机体的脂肪沉积,因此研究GH对机体脂质代谢的调控机理,对防止由脂肪沉积和肥胖引起的疾病非常重要。SOCS蛋白家族对GH信号通路中有重要调控作用,其中SOCS2与GH诱导的JAK/STAT信号通路关系犹为密切。猪的生理生化特点和遗传性能与人具有高度的相似性,是研究人类肥胖的理想动物模型。本试验以猪原代脂肪细胞为研究材料,探讨SOCS2对GH调控脂肪细胞分化和脂肪代谢的影响。本研究首先检测500 ng/mL GH诱导对猪原代脂肪细胞分化、脂肪代谢和SOCS2、SOCS3 mRNA表达的影响。其次构建SOCS2腺病毒载体,Ad-SOCS2感染猪原代脂肪细胞,利用Real-Time PCR和WB技术,分析超表达SOCS2对GH诱导的细胞分化因子和脂肪代谢关键酶表达的影响,并检测GH信号通路关键信号分子的表达和磷酸化水平,初步探讨SOCS2在GH调控猪原代脂肪细胞脂代谢中的作用。获得以下结论:1.500 ng/mL GH显著抑制了猪原代脂肪细胞的分化。500 ng/mL GH诱导前期PPARγ、FAS、ATGL和HSL mRNA表达量均显著升高（P<0.01）。并且随着GH诱导时间的延长,PPARγ和FAS mRNA表达显著下降（P<0.01）,ATGL和HSL mRNA表达量也有所下降,但仍显著高于PBS对照组（P<0.01）。GH诱导SOCS3 mRNA瞬时高表达,SOCS2 mRNA随GH诱导时间的延长稳定表达。2.酶切鉴定和测序均证明SOCS2基因的重组腺病毒载体构建成功,包装、扩繁后获得滴度为1×1010 PFU/m的Ad-SOCS2病毒液。Ad-SOCS2的感染显著增加了猪原代脂肪细胞中SOCS2 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）。3.超表达SOCS2显著抑制了GH诱导前期PPARγ、FAS、ATGL和HSL表达量的升高（P<0.01）。但是SOCS2的超表达并没有完全抑制GH诱导的ATGL和HSL表达量的升高。4.SOCS2的稳定高表达显著抑制了猪原代脂肪细胞中GH诱导的STAT5和STAT3 mRNA的表达及STAT3和STAT5的蛋白酪氨酸磷酸化水平（P<0.01）。并且在Ad-SOCS2转染的细胞中,SOCS3 mRNA维持在一个较低的表达水平。综上所述,GH诱导SOCS2 mRNA稳定表达,超表达SOCS2显著抑制了GH诱导的STAT5和STAT3蛋白酪氨酸磷酸化（P<0.01）,进而抑制了GH诱导的PPARγ、FAS、ATGL和HSL表达量的升高。因此SOCS2在GH通路调控猪原代脂肪细胞脂代谢非常重要。
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