分子靶标纳米氧化铁颗粒胰腺癌细胞的磁共振成像

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:starcui123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:构建趋化因子受体4(CXCR4)单克隆抗体与超微超顺磁性氧化铁颗粒(USPIO)的磁共振靶向成像分子探针CXCR4-USPIO,检测人胰腺癌AsPC-1、BxPC-3、CFPAC-1、 PANC-1细胞和人胰腺癌组织及人正常胰腺组织CXCR4的表达水平,探讨CXCR4-USPIO对四种人胰腺癌细胞的靶向结合能力、磁共振靶向成像能力及其与CXCR4表达水平的相关性。方法:采用化学共轭法通过碳二亚胺[1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)]将CXCR4单克隆抗体及牛血清蛋白(BSA)分别与USPIO进行偶联,构建CXCR4-USPIO及BSA-USPIO两种纳米铁颗粒拼接体,并利用MTS法评估CXCR4-USPIO的细胞安全性。检测相同Fe浓度梯度下CXCR4-USPIO、BSA-USPIO及USPIO溶液磁共振横向弛豫时间(T2值)及自由感应衰减时间(T2*值)的变化及差异。利用Western blot方法半定量检测四种人胰腺癌细胞CXCR4的表达水平;利用细胞免疫荧光法观察四种人胰腺癌细胞CXCR4的表达情况及表达部位,并半定量检测其表达水平;利用组织免疫组化方法观察人胰腺腺癌病理标本及人正常胰腺组织CXCR4的表达情况及表达部位。将CXCR4-USPIO、BSA-USPIO分别与四种人胰腺癌细胞孵育,行磁共振成像测定T2值及T2*值的变化及差异,并行普鲁士蓝染色观察铁颗粒结合及存在情况。结果:成功构建了CXCR4-USPIO、BSA-USPIO两种纳米铁颗粒拼接体,MTS细胞毒性试验结果显示CXCR4-USPIO拼接体Fe浓度在20011gFe/ml以下时,细胞相对增殖率保持在80%以上。磁共振成像结果显示,CXCR4-USPIO与USPIO相比,在相同浓度梯度下,T2值及T2*值无明显差异,CXCR4-USPIO、 USPIO、BSA-USPIO三组的△R2及△R2*值与溶液Fe浓度存在线性正比关系。Western blot方法显示四种人胰腺癌细胞CXCR4蛋白表达水平从高到低依次为:BxPC-3,CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1;细胞免疫荧光结果显示CXCR4主要表达部位位于细胞膜及胞浆,平均荧光信号强度从高到低依次为:BxPC-3, CFPAC-1, PANC-1, AsPC-1;组织免疫组化结果显示人胰腺癌组织中CXCR4表达水平明显高于人正常胰腺组织。CXCR4-USPIO与四种细胞孵育组的T2值和T2*值均分别低于BSA-USPIO孵育组,CXCR4-USPIO与AsPC-1、 BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1细胞孵育后的T2强化率分别为:54.92%、85.36%、80.16%、56.95%,与Western blot法测定四种细胞CXCR4蛋白条带灰度值及激光扫描共聚焦显微镜检测四种细胞的CXCR4平均荧光信号强度均具有良好的相关性(Western blot法r=0.976,P=0.024;激光扫描共聚焦显微镜法r=0.996,P=0.004)。普鲁士蓝染色可见CXCR4-USPIO组铁颗粒存留较多,且集中分布于细胞膜周围,而BSA-USPIO组铁颗粒存留稀少,且散在分布于细胞间隙。结论:CXCR4-USPIO颗粒对表达CXCR4的多种人胰腺癌细胞均具有较好的靶向结合能力和靶向成像能力,且T2强化率能够在一定程度上反映细胞CXCR4蛋白的表达水平。
其他文献
目的:研究大黄中大黄酸、大黄素,附子中去甲乌药碱,以及大黄酸、大黄素与去甲乌药碱分别配伍后在Caco-2细胞模型上的转运过程。方法:以大黄酸、大黄素、去甲乌药碱的累积转运
神东矿区煤层具有埋藏浅、易开采的特点,但综采工作面在回采过程中,地表塌陷裂隙,造成工作面漏风严重,影响矿井的正常生产。本文介绍了均压通风技术在榆家梁煤矿的应用,阐述
在现代汉语中,敬辞容易用混,准确使用敬辞,要从动作的主体来考虑,才能避免敬辞误用现象的发生。本文主要分析了几种敬辞误用的现象,以期减少社会上敬辞的错误使用现象。
通过对钛合金切削性能的分析,选取合适的刀具材料,设计出合理的铣刀结构参数、几何参数,较好地实现钛合金的铣削。
秉承中国古代文学中文人心态的稳定性与艺术表现形式的传承性等特征,宋词中的“时间书写”也以对光阴易逝的焦虑和对生命永恒的渴望为主旋律,其文化蕴涵与审美心理,既有对前
今年1月13日,是前国民党领导人蒋经国的20年忌日。在他晚年,开放了“报禁、党禁”,解除戒严,开放赴大陆探亲。20年来,虽时局变迁,蒋经国为两岸关系改善和岛内社会经济发展打下的基
课堂提问是初中数学教学中师生互动的基本形式,在初中数学课堂教学中,教师应从学生的兴趣点来提问,激发学生学习兴趣,以提高课堂参与度,并结合知识点提出问题,引导学生循序渐
目的 探讨肾包虫病的诊治方法。 方法 对 1985年 2月至 1999年 1月收治的肾包虫病 2 8例资料进行分析 , 结果  2 8例病人均有疫区接触史 ,患侧肾区痛和腹部包块为主要临
期刊
目的探讨四逆散合越鞠丸加减配合西药四联疗法治疗肝气犯胃型胆汁反流性胃炎的疗效及对患者内环境的影响。方法选取2017年1月至2018年8月间陕西省第四人民医院消化内科收治的
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield