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目的:构建趋化因子受体4(CXCR4)单克隆抗体与超微超顺磁性氧化铁颗粒(USPIO)的磁共振靶向成像分子探针CXCR4-USPIO,检测人胰腺癌AsPC-1、BxPC-3、CFPAC-1、 PANC-1细胞和人胰腺癌组织及人正常胰腺组织CXCR4的表达水平,探讨CXCR4-USPIO对四种人胰腺癌细胞的靶向结合能力、磁共振靶向成像能力及其与CXCR4表达水平的相关性。方法:采用化学共轭法通过碳二亚胺[1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)]将CXCR4单克隆抗体及牛血清蛋白(BSA)分别与USPIO进行偶联,构建CXCR4-USPIO及BSA-USPIO两种纳米铁颗粒拼接体,并利用MTS法评估CXCR4-USPIO的细胞安全性。检测相同Fe浓度梯度下CXCR4-USPIO、BSA-USPIO及USPIO溶液磁共振横向弛豫时间(T2值)及自由感应衰减时间(T2*值)的变化及差异。利用Western blot方法半定量检测四种人胰腺癌细胞CXCR4的表达水平;利用细胞免疫荧光法观察四种人胰腺癌细胞CXCR4的表达情况及表达部位,并半定量检测其表达水平;利用组织免疫组化方法观察人胰腺腺癌病理标本及人正常胰腺组织CXCR4的表达情况及表达部位。将CXCR4-USPIO、BSA-USPIO分别与四种人胰腺癌细胞孵育,行磁共振成像测定T2值及T2*值的变化及差异,并行普鲁士蓝染色观察铁颗粒结合及存在情况。结果:成功构建了CXCR4-USPIO、BSA-USPIO两种纳米铁颗粒拼接体,MTS细胞毒性试验结果显示CXCR4-USPIO拼接体Fe浓度在20011gFe/ml以下时,细胞相对增殖率保持在80%以上。磁共振成像结果显示,CXCR4-USPIO与USPIO相比,在相同浓度梯度下,T2值及T2*值无明显差异,CXCR4-USPIO、 USPIO、BSA-USPIO三组的△R2及△R2*值与溶液Fe浓度存在线性正比关系。Western blot方法显示四种人胰腺癌细胞CXCR4蛋白表达水平从高到低依次为:BxPC-3,CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1;细胞免疫荧光结果显示CXCR4主要表达部位位于细胞膜及胞浆,平均荧光信号强度从高到低依次为:BxPC-3, CFPAC-1, PANC-1, AsPC-1;组织免疫组化结果显示人胰腺癌组织中CXCR4表达水平明显高于人正常胰腺组织。CXCR4-USPIO与四种细胞孵育组的T2值和T2*值均分别低于BSA-USPIO孵育组,CXCR4-USPIO与AsPC-1、 BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1细胞孵育后的T2强化率分别为:54.92%、85.36%、80.16%、56.95%,与Western blot法测定四种细胞CXCR4蛋白条带灰度值及激光扫描共聚焦显微镜检测四种细胞的CXCR4平均荧光信号强度均具有良好的相关性(Western blot法r=0.976,P=0.024;激光扫描共聚焦显微镜法r=0.996,P=0.004)。普鲁士蓝染色可见CXCR4-USPIO组铁颗粒存留较多,且集中分布于细胞膜周围,而BSA-USPIO组铁颗粒存留稀少,且散在分布于细胞间隙。结论:CXCR4-USPIO颗粒对表达CXCR4的多种人胰腺癌细胞均具有较好的靶向结合能力和靶向成像能力,且T2强化率能够在一定程度上反映细胞CXCR4蛋白的表达水平。