慢病毒介导的shRNA下调Nav 1.7表达对慢性炎性痛模型大鼠疼痛行为学的影响

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目的:观察蛛网膜下腔注射Nav1.7 shRNA慢病毒载体对慢性炎性痛大鼠疼痛行为学的影响及脊髓背根神经节(Dorsal Root Ganglion,DRG)Nav1.7的表达情况和脊髓星形胶质细胞的活化状态(即GFAP的表达)。方法:成年健康SPF级SD大鼠18只,体重180-200g,随机分为3组(n=6):对照组(Control组)、慢性炎性痛组(CFA组)和慢病毒+慢性炎性痛组(LV+CFA组)。Control组不做任何处理,CFA组采用右后足脚底皮下注射0.1ml完全弗氏佐剂(Complete Freund’s Adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型,LV+CFA组在右后足皮下注射0.1ml CFA后,蛛网膜下腔注射10ul Nav1.7 shRNA慢病毒载体。各组大鼠分别于建模前及建模后1、3、5、7、9、11、13天测量机械缩足阈值(Mechanical Withdrawal Threshold,MWT)和热刺痛潜伏期(Paw Withdrawal Thermal Latency,PWTL),并在建模后第14天处死所有大鼠取大鼠右侧L4-L6 DRG及脊髓腰膨大,用RT-PCR及Western-blot方法检测DRG的Nav1.7及脊髓腰膨大GFAP的表达。结果:与Control组相比,CFA组大鼠1-13天时机械缩足阈值降低及热刺痛潜伏期缩短(P<0.05),RT-PCR及Western-blot检测出DRG中Nav 1.7升高和脊髓腰膨大中GFAP升高(P<0.05);与CFA组相比较,LV+CFA组蛛网膜下腔注射Nav1.7 shRNA慢病毒载体后1-13天时机械缩足阈值升高及热刺痛潜伏期延长(P<0.05),RT-PCR及Western-blot检测出DRG中Nav 1.7降低(P<0.05),脊髓腰膨大中GFAP表达未减低(P>0.05)。结论:蛛网膜下腔注射Nav1.7 shRNA慢病毒载体可有效缓解CFA诱导的慢性炎性痛,并对大鼠DRG的Nav1.7的表达产生明显的抑制作用,但对脊髓腰膨大中GFAP表达无影响。
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