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MCPH1 (Microcephalin 1),也称为BRIT1,具有抑制人类端粒酶逆转录酶的功能,是细胞周期检测点的调节蛋白,参与DNA损伤应答和修复、维持基因组的稳定性。MCPH1的表达缺失可导致原发性小头畸形,参与人类多种恶性肿瘤的发生与发展,由此证明MCPH1是一个肿瘤抑制基因。宫颈癌是妇女常见的侵袭性肿瘤,研究证实,宫颈癌中MCPH1呈表达缺失,并且MCPH1表达缺失与宫颈癌细胞增殖、凋亡等多种生物学行为有关。顺铂是宫颈癌治疗中常用化疗药物,主要通过激活死亡受体信号转导通路,引起肿瘤细胞凋亡,但顺铂的长期使用使肿瘤细胞对顺铂的耐药性增强。鉴于MCPH1是一个肿瘤抑制基因,本课题通过将MCPH1作为增强化疗药物敏感性的因子,将MCPH1过表达体系和顺铂结合处理宫颈癌Caski细胞,检测Caski细胞增殖、凋亡效应的改变,并初步探讨其机制。采用的主要实验方法如下：1.经重组慢病毒Lent-MCPH1和慢病毒空载体Lent-vector转染并筛选的宫颈癌Caski细胞,即过表达组(Lent-MCPH1)和阴性对照组(Lent-vector),分别用顺铂处理,MTT法检测生长抑制效率,制定增殖抑制曲线。2.将Lent-MCPH1组和Lent-vector组分别用顺铂处理后,DAPI染色法观察细胞凋亡形态,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。3.Real-time PCR检测相关基因Bax、Caspase-3和p53 mRNA表达水平。通过以上试验,得出以下结果和结论：1. Lent-vector组细胞经顺铂处理后,其增殖明显受到抑制；而在顺铂处理的两组细胞中,与Lent-vector对照组相比,Lent-MCPH1组细胞受到的生长抑制作用更加明显。2. DAPI染色形态学显示,Lent-vector组细胞经顺铂处理后,细胞凋亡明显增多；而在顺铂处理的两组细胞中,Lent-MCPH1组的凋亡小体的量比Lent-vector组明显增多,可见致密强荧光。同样,流式细胞仪检测细胞凋亡率结果为,顺铂处理Lent-vector细胞后,其早期和晚期凋亡率均明显升高,与顺铂处理前相比其总凋亡率升高了44.84%；而在顺铂处理的两组细胞中,Lent-MCPH1组的总凋亡率比Lent-vector组高13.21%,其中晚期凋亡更明显,Lent-MCPH1组比Lent-vector组高17.16%。3. Real-time PCR检测凋亡相关基因mRNA表达水平显示为：Lent-vector组细胞经顺铂处理前后相比,处理后的细胞Bax、Caspase-3、 p53的mRNA表达分别上升0.61、0.93和1.85倍；而在顺铂处理的两组细胞中,Lent-MCPH1组细胞Bax、Caspase-3、p53的mRNA表达比Lent-vector组分别高出1.96、0.78、0.12倍。MCPH1可通过抑制增殖和促进凋亡等机制,来增强宫颈癌Caski细胞对顺铂的敏感性。