重度子痫前期与假性血友病因子相关性的临床标本检测和体外实验研究

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【目的】通过体外实验和临床标本检测,研究重度子痫前期假性血友病因子(VonWillebrandFactor,VWF)转录、合成、分泌水平变化特点。【方法】1.无菌采集并枸橼酸钠抗凝孕产妇分娩前、分娩后第3天外周血和脐血;剖宫产术中无菌采集脐带和胎盘组织;2.脐静脉内皮细胞(HUVEC,human umbilical vein endothelial cell)原代及传代培养;3.荧光定量PCR法检测脐带和胎盘组织中内皮细胞表达VWF水平以及Cocl2(100umol/L)对传代培养的脐静脉内皮细胞VWF表达的影响;4.免疫组织化学方法检测脐带和胎盘组织中内皮细胞VWF的合成以及Cocl2(100umol/L)对传代培养的脐静脉内皮细胞VWF表达的影响;5.ELISA检测孕产妇分娩前、分娩后第3天外周血和脐血血浆中VWF蛋白量以及Cocl2(100umol/L)对传代培养的脐静脉内皮细胞分泌VWF的影响。【结果】1.与正常妊娠组比较,重度子痫前期组分娩前、分娩后第3天外周血和脐血血浆中VWF水平均明显升高;与分娩前相比,两组产后第3天血浆中VWF水平均无明显改变(P>0.05);2.与正常妊娠组比较,重度子痫前期组胎盘和脐带组织中内皮细胞VWF编码基因转录水平均明显升高(P<0.05);3.与正常妊娠组比较,重度子痫前期组胎盘和脐带组织内皮细胞内VWF蛋白水平无明显差异(P>0.05);4.Cocl2(100umol/L)诱导细胞缺氧可以导致内皮细胞合成和分泌VWF增加,而细胞内VWF水平无明显改变。【结论】1.重度子痫前期孕产妇外周血中VWF蛋白含量增加且分娩后第3天仍无明显下降;胎盘和脐带VWF表达和分泌增加2.Cocl2诱导内皮细胞缺氧可以导致内皮细胞表达和分泌VWF增加;3.内皮细胞缺氧可能是子痫前期出现VWF表达和分泌增加的原因。
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