伊犁鹅繁殖规律及生殖激素调控的研究

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本研究通过对伊犁鹅繁殖周期中主要生殖激素浓度的测定,结合卵巢及卵泡发育情况的研究,探讨伊犁鹅繁殖周期中生殖激素的变化规律;通过外源性激素调控的方式,对就巢期伊犁鹅生殖激素、卵巢及卵泡发育情况进行测定;采用PCR-SSCP(Single-Strand Conformation Polymorphism,SSCP)技术,检测伊犁鹅产蛋性能相关基因的多态性。通过以上研究为改善和提高伊犁鹅的繁殖性能,扩大其种群数量,以及进一步研究伊犁鹅的生殖调控技术和分子标记辅助选择提供理论基础。试验一:试验选取健康状况良好,体重相近的2岁伊犁鹅,分别在产蛋期、就巢期及休产期各随机选取32只,采集1次血样,测定激素水平;并分别在各时期随机选取5只采集卵巢组织,观察并测定卵巢及卵泡发育情况。结果表明:在产蛋期,伊犁鹅的促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)分别极显著高于就巢期和休产期16.70%(P<0.0l)和58.28%(P<0.0l);催乳素(prolactin,PRL)显著低于就巢期13.00%(P<0.05),极显著高于休产期28.94%(P<0.01);促卵泡素(follicle-stimulating hormone,FSH)高于于就巢期6.98%(P>0.05),极显著高于休产期21.12%(P<0.0l);促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)极显著低于就巢期8.38%(P<0.0l),极显著高于休产期16.84%(P<0.05);雌二醇(Estradiol,E2)分别极显著高于就巢期和休产期29.80%(P<0.0l)和112.40%(P<0.0l);孕酮(progesterone,P4)水平分别极显著高于就巢期和休产期28.89%(P<0.0l)和30.34%(P<0.0l)。产蛋期伊犁鹅的卵巢重量和体积均极显著大于就巢期和休产期(P<0.01)。产蛋期卵巢上多等级卵泡生长发育活跃,层次分明;就巢期卵巢的内部有多个不同大小的各级萎缩及闭锁卵泡;休产期卵巢明显萎缩,卵泡胞质空腔变大,向内凹陷。试验二:选取健康状况良好,体重相近的30只2岁伊犁鹅随机分成5组,对照组为空白对照组及肌注生理盐水组,试验组分为肌注丙酸睾丸酮组、肌注LHRH-A3组及口服甲磺酸溴隐亭片组。分别在试验的1 d、3 d、5 d、7 d、9 d及14 d,空腹翅静脉采血4 mL/只,测定相关生殖激素指标。试验第14 d,每组随机选取4只采集卵巢组织,观察并测定卵巢及卵泡发育情况。结果表明:通过肌注丙酸睾丸酮处理后,伊犁鹅血浆GnRH、PRL整体呈下降趋势,FSH呈上升趋势,LH、E2呈波动变化,P4浓度变化不大。试验组卵巢重量、宽度和厚度分别比对照组增加81.40%(P<0.05)、57.93%(P<0.05)和41.65%(P<0.05)。经肌注LHRH-A3后,试验组LH、GnRH先上升,之后下降,PRL、P4呈上升的变化趋势;伊犁鹅卵巢的体积和重量均比对照组高,但无显著性差异;卵巢宽度比对照组增加66.19%(P<0.05),卵巢厚度比对照组增加62.99%(P<0.01)。口服甲磺酸溴隐亭片后,可使就巢期伊犁鹅PRL、P4、E2浓度显著下降,FSH浓度显著上升;试验组的原始卵泡直径、卵母细胞直径和颗粒层厚度分别显著高于对照组34.43%(P<0.05)、35.00%(P<0.05)和50.00%(P<0.05);试验组的初级卵泡直径和卵母细胞直径分别显著高于对照组24.68%(P<0.05)和30.09%(P<0.05)。试验三:采集68只2岁伊犁鹅血样(4 mL/只),利用PCR-SSCP技术和测序方法分析了伊犁鹅GnRH基因5’端调控区、PRL基因外显子5、ESR基因外显子4和FSHβ基因外显子2多态性。结果显示:GnRH得到两种基因型为AA、AB,该群体中基因型频率分别为0.70和0.30;FSH得到三种基因型为AA、AG和GG,该群体中基因型频率分别为0.53、0.10和0.36。ESR基因外显子4和PRL基因外显子5未检测到多态性。GnRH和FSHβ基因位点的多态信息含量(PIC)分别为0.222和0.367。
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