血栓性疾病是一种常见的心脑血管病,严重危害着人类的健康和生命。蚓激酶能溶解血栓,降低血液粘稠度,抑制血小板聚集,降低纤维蛋白原及改善微循环,具有很好的体内外溶栓抗凝作用,在临床上显示对多种心血管疾病具有良好疗效。本研究尝试利用植物生物反应器——向日葵表达生物融合蛋白CTB-LK。首先,将具有良好的免疫佐剂和输送载体功能的CTB的基因ctb与蚓激酶LK的基因lk连接,随后构建植物双元表达载体pX6-ctb-lk,通过电击法将载体质粒导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株C58获得了工程菌。通过农杆菌介导法转化向日葵,经筛选,最终获得了4株具有卡那霉素抗性的向日葵再生植株,其中2株已经获得了向日葵种子。用CTAB法提取向日葵基因组DNA做PCR特异扩增,检测出3株是阳性的,这初步表明ctb-lk基因已经成功导入向日葵的细胞中。提取转基因植株的总RNA做RT-PCR,结果显示向日葵植株扩增出特异性目的片段,证明ctb-lk基因已成功整合到转基因向日葵的基因组中,并实现转录。本研究首次成功地利用向日葵表达了蚓激酶融合蛋白,有关蛋白分离纯化、活性检测及动物学实验等工作还有待进一步展开。该研究为利用植物系统表达外源蛋白提供了一定的技术和理论支持,也为利用转基因向日葵生产其它药用蛋白奠定了坚实的基础。