引物合成酶DnaG在原核生物的DNA复制中有着重要的调控作用，已有研究表明c-di-GMP和耻垢分枝杆菌的引物合成酶DnaG存在相互作用。但是它们的具体结合位点、互作机制及如何共同调控DNA复制的机理都还不清楚。本课题以耻垢分枝杆菌的引物合成酶DnaG为研究材料，从蛋白质性质和结构等方面对DnaG和c-di-GMP的互作机理进行研究。主要研究结果如下:　　1.利用DnaG全长和不同结构域构建了19个原核载体并表达，成功纯化了116-630、121-460、116-440、461-636、477-630、121-630等结构域，用于结晶。　　2.通过生物信息学、不完全酶解及质谱的手段，确定了DnaG中460-477这一段为无序结构，连接着TOPRIM结构域和C端的解旋酶结合结构域。　　3.优化121-460的晶体，加入添加剂后，晶体衍射分辨率由7(A)提高到3.8(A)。但是数据还不够好，不能解析结构，还需继续优化晶体。　　4.表达并纯化YdeH-pET-28a，利用YdeH体外大量合成c-di-GMP。优化合成及纯化的工艺，目前可以达到在反应3h后，GTP可以全部被合成为c-di-GMP。12mg YdeH可以合成1mg c-di-GMP。　　5.利用合成的c-di-GMP与121-460共结晶，初筛长出晶体，对晶体进行优化，但是分辨率不高，晶体优化仍需继续进行。　　本研究通过大量的蛋白表达和结晶尝试，摸索出了DnaG蛋白纯化和结晶的方法，并确定了DnaG中影响结晶稳定性的无序结构，为日后DnaG三维结构的解析奠定了基础。改善了通常利用HPLC提取c-di-GMP的工艺，利用离子交换层析的手段，大量、快速地提取c-di-GMP。然而，对于DnaG三维结构及其和c-di-GMP复合物的三维结构的解析，后续还需进一步摸索优化晶体生长的条件，以获得高分辨率的晶体。