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本文以甘草不同炮制品为研究对象,进行了蜜酒炙炮制工艺制备及优选、化学成分含量测定、不同炮制品的抑菌活性和抗氧化活性比较等研究,具体内容如下:
以文献典籍作为依据,分别制备甘草七种不同的炮制品:蜜炙品、清炒品、酒蒸品、酒炙品、姜炙品、姜润品和蜜酒炙品。采用Box-Behnken响应面法优选甘草蜜酒炙工艺。通过单因素试验筛选影响蜜酒炙质量的关键因素,以炼蜜比例、闷润时间、炒制温度为影响因素,以蜜酒炙甘草的外观性状、甘草苷和甘草酸含量的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优选蜜酒炙甘草的最佳炮制工艺,并进行工艺验证。结果表明蜜酒炙甘草最佳炮制工艺为炼蜜比例为47.56%,闷润时间6.76h,炒制温度69.74℃。
建立HPLC法同时测定甘草不同炮制品七种成分的含量:甘草苷、异甘草苷、甘草酸、甘草次酸、甘草素、异甘草素和甘草查尔酮A。实验结果表明生品经炮制后,酒蒸品的甘草苷和甘草酸含量最高;蜜炙品中甘草苷含量下降,其他成分含量均升高,其中异甘草苷、异甘草素、甘草查尔酮A含量最高;经过清炒后的甘草所含甘草次酸含量最高。
采用紫外分光光度计分别以芦丁和甘草酸铵为标准品,对甘草不同炮制品的总黄酮和总皂苷含量进行测定,并比较炮制前后生品和各类炮制品的含量。炮制品总黄酮用甲醇提取,采用10%氢氧化钾溶液为显色剂,实验结果表明总黄酮含量由高到低为:酒蒸品>酒炙品>蜜酒炙品>蜜炙品>姜炙品>清炒品>生品甘草>姜润品;采用酸沉碱溶的方法提取皂苷,实验结果总皂苷含量由高到低为:酒蒸品>蜜炙品>姜炙品>清炒品>酒炙品>蜜酒炙品>生品>姜润品。
对甘草不同炮制品的不同提取物进行抑菌活性研究,依次选择甲醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,采用滤纸片法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌进行抑菌圈直径测定,比较甘草生品及炮制品间的抑菌能力。实验结果表明:甘草及其炮制品对金黄色葡萄球菌的抑菌能力优于大肠杆菌和白色念珠菌。总体来看,酒蒸品抑菌活性最强,姜润品和生品抑菌活性较弱。甘草及炮制品的不同提取物的抑菌能力由强到弱依次为:乙酸乙酯粗提物>石油醚粗提物>甲醇粗提物>正丁醇粗提物。
对甘草不同炮制品进行抗氧化能力研究,考察其对DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力、羟自由基(·OH)清除能力和超氧阴离子的清除能力。实验结果表明:各样品粗提物对自由基的清除率随着质量浓度增大而增高。当质量浓度为1.2mg/mL时,酒蒸品的清除率最高,抗氧化活性最强。甘草及不同炮制品提取物在清除自由基能力方面由强到弱依次为:羟基(·OH)自由基清除能力>DPPH·自由基清除>超氧阴离子(O2-)自由基清除能力>ABTS+·自由基清除能力。
以文献典籍作为依据,分别制备甘草七种不同的炮制品:蜜炙品、清炒品、酒蒸品、酒炙品、姜炙品、姜润品和蜜酒炙品。采用Box-Behnken响应面法优选甘草蜜酒炙工艺。通过单因素试验筛选影响蜜酒炙质量的关键因素,以炼蜜比例、闷润时间、炒制温度为影响因素,以蜜酒炙甘草的外观性状、甘草苷和甘草酸含量的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优选蜜酒炙甘草的最佳炮制工艺,并进行工艺验证。结果表明蜜酒炙甘草最佳炮制工艺为炼蜜比例为47.56%,闷润时间6.76h,炒制温度69.74℃。
建立HPLC法同时测定甘草不同炮制品七种成分的含量:甘草苷、异甘草苷、甘草酸、甘草次酸、甘草素、异甘草素和甘草查尔酮A。实验结果表明生品经炮制后,酒蒸品的甘草苷和甘草酸含量最高;蜜炙品中甘草苷含量下降,其他成分含量均升高,其中异甘草苷、异甘草素、甘草查尔酮A含量最高;经过清炒后的甘草所含甘草次酸含量最高。
采用紫外分光光度计分别以芦丁和甘草酸铵为标准品,对甘草不同炮制品的总黄酮和总皂苷含量进行测定,并比较炮制前后生品和各类炮制品的含量。炮制品总黄酮用甲醇提取,采用10%氢氧化钾溶液为显色剂,实验结果表明总黄酮含量由高到低为:酒蒸品>酒炙品>蜜酒炙品>蜜炙品>姜炙品>清炒品>生品甘草>姜润品;采用酸沉碱溶的方法提取皂苷,实验结果总皂苷含量由高到低为:酒蒸品>蜜炙品>姜炙品>清炒品>酒炙品>蜜酒炙品>生品>姜润品。
对甘草不同炮制品的不同提取物进行抑菌活性研究,依次选择甲醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,采用滤纸片法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌进行抑菌圈直径测定,比较甘草生品及炮制品间的抑菌能力。实验结果表明:甘草及其炮制品对金黄色葡萄球菌的抑菌能力优于大肠杆菌和白色念珠菌。总体来看,酒蒸品抑菌活性最强,姜润品和生品抑菌活性较弱。甘草及炮制品的不同提取物的抑菌能力由强到弱依次为:乙酸乙酯粗提物>石油醚粗提物>甲醇粗提物>正丁醇粗提物。
对甘草不同炮制品进行抗氧化能力研究,考察其对DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力、羟自由基(·OH)清除能力和超氧阴离子的清除能力。实验结果表明:各样品粗提物对自由基的清除率随着质量浓度增大而增高。当质量浓度为1.2mg/mL时,酒蒸品的清除率最高,抗氧化活性最强。甘草及不同炮制品提取物在清除自由基能力方面由强到弱依次为:羟基(·OH)自由基清除能力>DPPH·自由基清除>超氧阴离子(O2-)自由基清除能力>ABTS+·自由基清除能力。