苗药黑骨藤的生药学以及化学成分研究

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本文对苗药黑骨藤(Periploca forrestii Schltr)进行了生药学研究并对其化学成分进行了TLC薄层色谱和HPLC指纹图谱研究。在生药学研究中采集四川以及贵州两省的黑骨藤原植物标本,对其标本进行石蜡切片观察,对黑骨藤的西昌原产地药材进行粉末观察和化学鉴定。黑骨藤原植物的显微特点:其叶为①上表皮细胞一列,类方形或长方形;下表皮细胞一列,类圆形,细胞稍小,少见气孔。②栅栏组织一列,圆柱形,通过中脉;海绵组织类圆形,排列疏松;均含叶绿体。③外韧型维管束。木质部向茎面,导管单列,放射状排列成5~7列;韧皮部在下,其外侧有细胞壁稍薄的纤维束环绕。④在主脉的上、下表皮内侧有1~2列厚角组织⑤栅栏组织中可见草酸钙簇晶。根和茎的特点为木栓层为15-30列或更多列木栓细胞组成,其内侧有2-3列扁平薄壁细胞构成木栓形成层区,再向内则为栓内层,由4-9列细胞组成,细胞中含有少量淀粉粒有的细胞中含1-2个草酸钙结晶。韧皮部有石细胞群散在韧皮射线有1-5列细胞,细胞壁薄性,内含有较多淀粉粒,少数细胞含1-2个草酸钙棱晶。粉末观察的特点为草酸钙结晶呈棱形或方形,长10-35μm。淀粉粒单粒呈三角形,椭圆形、半圆形或葫芦形,直径3-16μm,复粒由2-4个分粒组成。石细胞黄色,多边形或方形,长16-51μm,胞腔及壁孔明显,胞壁厚10-16μm。导管多具缘纹孔,少数网纹,直径27-180μm。黑骨藤化学成分的分离:黑骨藤根茎的乙醇浸提物经过萃取分为石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水五个部分,经过反复硅胶柱层析、薄层层析等方法分离纯化得到黑骨藤氯仿提取物、乙酸乙酯提取物的最佳薄层色谱分离方法。氯仿提取物的分离方法是以硅胶为固定相,以乙酸乙酯和石油醚(1:15)为展开剂,得到9个分离点;乙酸乙酯提取物的分离方法是以硅胶为固定相,以乙酸乙酯和石油醚(1:10)为展开剂,得到7个分离点。在薄层色谱分离条件的基础上,用硅胶柱色谱对氯仿提取物进行分离。硅胶柱色谱的分离条件是色谱柱为Ф1.5×30cm,洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚(1:15),在此条件下,得到三个片段的物质。将第一个片段的物质用Ф1.2×50cm的硅胶柱,经乙酸乙酯和石油醚(1:50)洗脱,并通过不同比例的乙酸乙酯、石油醚、氯仿和正丁醇等展开剂的的薄层色谱的分离得到三个纯化合物,对这三个纯化合物进行了紫外和红外光谱测定。黑骨藤原植物提取液的HPLC指纹图谱:建立其梯度洗脱的方法学,对贵州和四川5个产地的原植物提取液进行指纹图谱的对比发现氯仿层中有7个较大的共有峰;乙酸乙酯层中有11个较大共有峰,这可以作为黑骨藤的特征峰,结果发现,不同产地的样品有一定的相似性,但也有所不同,可以作为该植物的资源开发的质量标准。
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