阪崎肠杆菌曾名为黄色阴沟肠杆菌,阪崎肠杆菌被认为是严重危害特定人群,危害生命或导致慢性实质性后遗症的致病菌,其致死率为40%-80%。电化学免疫传感器具有高特异性、简易低廉、易于携带等优点而被广泛应用于临床诊断、环境分析和食品产业等领域。应用新材料,例如多壁碳纳米管(multi-wall carbon nanotubes, MWCNTs)和离子液体(i)nic liquid,IL)制作传感器是当前生物传感器研究领域的热点。本论文主要围绕以下几个方面开展了研究工作：1阪崎肠杆菌抗原的制备本试验成功制备了以0.4%(v/v)甲醛灭活12h的阪崎肠杆菌抗原,此抗原具有良好的生物活性和特异性,为后续研究工作的顺利开展奠定了基础。2基于多壁碳纳米管/硫堇阪崎肠杆菌免疫传感器的研究为了研制一种灵敏度高、电化学性能稳定的免疫传感器,构建准确检测阪崎肠杆菌的电化学方法,将硫堇、辣根过氧化物酶标记的阪崎肠杆菌抗体依次自组装固定于多壁碳纳米管/十二烷基苯磺酸钠修饰的四通道丝网印刷电极上,制得一次性免疫传感器。采用原子力显微镜表征电极修饰和孵育抗原后的表而形态,用循环伏安法考察不同修饰电极的电化学特性,根据还原峰电流的变化对阪崎肠杆菌进行测定。在优化的试验条件下,该方法检测阪崎肠杆菌的线性范围为102～108CFU/mL,检测限为5.7×101CFU/mL(S/N=3)。该免疫传感器灵敏度高,具有较好的特异性、重现性(RSD=6.3%)、稳定性(4℃无菌容器中放置15d后电流响应为初始值的93.24%)和准确性(与GB/T4789.40-2010符合率为96.67%),具有一定的应用潜力。3基于多壁碳纳米管/离子液体/硫堇的阪崎肠杆菌免疫传感器首次研发了基于多壁碳纳米管/离子液体/硫堇修饰丝网印刷电极的免疫传感器,提高了免疫传感器的贮存稳定性。用原子力显微镜表征电极各层修饰后的表面形态,用循环伏安法考察修饰电极的电化学特性,十二烷基苯磺酸钠降低了多壁碳纳米管/离子液体胶体的背景电流。包埋在离子液体中的阪崎肠杆菌酶标抗体表现出较高的活性和稳定性((4℃无菌容器中放置30d后电流响应为初始值的96.30%)。在最优条件下,该方法检测阪崎肠杆菌的线性范围为103～109CFU/mL,在磷酸盐缓冲溶液检出限为7.7×101CFU/mL(S/N=3),模拟样品检出限为8.3×102CFU/mL4基于MWCNT/Nafion和离子液体[BMIM]PFF6的免疫传感器研究为改善基于MWCNT/Nafion生物传感器电化学信号及储存的稳定性,采用[BMIM]PF6/Nafion复合物将辣根过氧化物酶标抗体包埋固定于MWCNT/Nafion修饰的丝网印刷碳电极上,构建了一种新的免疫传感器。用原子力显微镜表征电极各层修饰后的表面形态,用循环伏安法和交流阻抗法考察修饰电极的电化学特性,利用还原峰电流变化对被检物进行测定。本试验选用阪崎肠杆菌为目标抗原,在优化的检测条件下,该方法检测阪崎肠杆菌的线性范围为103～109CFU/mL,检出限为3.4×102CFU/mL(S/N=3)。该免疫传感器的储存稳定性有明显改善,4℃放置30d后电流响应值仍为初始值的95.50%,且具有较高的灵敏度,较好的重现性(RSD<6%)、特异性(非目标抗原的△Ipc<0.3μA)和准确性(与GB/T4789.40-2010符合率为100%),操作简便、成本低,有很好的潜在应用价值。