【摘 要】
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Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)信号通路在对病原体的免疫应答中起到了非常重要的作用。在无脊椎动物中,JAK/STAT信号通路的三个核心组分(Domeless,Hopscotch和
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Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)信号通路在对病原体的免疫应答中起到了非常重要的作用。在无脊椎动物中,JAK/STAT信号通路的三个核心组分(Domeless,Hopscotch和STAT92E)在黑腹果蝇中首先被鉴定出来并且已被证实具有免疫相关的功能。但是,JAK/STAT信号通路是否影响甲壳动物的固有免疫反应及其作用机理尚不明确。因此,我们以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)这一我国重要水产经济物种为研究对象,对JAK/STAT信号通路是否具有免疫相关的功能作出了初步研究。其结果能够帮助我们更好理解甲壳动物固有免疫的作用方式,为中华绒螯蟹养殖业乃至其他甲壳动物经济物种的细菌性病害问题解决提供理论基础。在本研究中,我们首次在中华绒螯蟹中完成了对JAK/STAT信号通路三个主要元件DOME(EsDOME),JAK(EsJAK)和STAT(Es STAT)的基因克隆和鉴定。EsDOME,EsJAK和EsSTAT分别是由4200,3333和2385bp开放阅读框编码的1299,1110和794个氨基酸构成蛋白质。生物信息学分析显示,三者都具有相应功能的特定结构域。为了探究JAK/STAT信号通路是否和免疫应答有潜在的联系,我们通过qRTPCR技术检测发现EsDOME,EsJAK和EsSTAT在鳃,肝胰腺和血细胞等免疫相关的组织中存在高表达。同时,体内攻毒实验表明EsDOME,EsJAK和EsSTAT在血细胞中表达水平显著升高。此外,我们在干扰了EsDOME基因以及抑制了Es STAT蛋白后,在受到细菌刺激后发现了相应的抗菌肽表达量有所下降。我们推测JAK/STAT信号通路是通过正向调节抗菌肽的表达来参与抗细菌免疫应答。本研究完成了对中华绒螯蟹JAK/STAT信号通路基本框架的构建并确定了其在先天免疫中具有调控抗菌肽表达来影响中华绒螯蟹抗菌活性的功能,为甲壳动物免疫相关信号通路的研究提供了重要的参考意义。
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