维生素E对苯并[a]芘诱导SD雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panxi1210
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随着生活水平的改善,生殖类疾病,如不孕不育症的发生在不断地增加,因此生殖系统的健康也越来越受到公众的重视。作为多环芳香烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons, PAHs)的代表物,苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene, B[a]P)是确定的具有生殖毒作用的有机物。既往有关B[a]P生殖毒性的研究表明,B[a]P暴露会影响大鼠睾丸精液量、精子数目以及精子存活率。B[a]P会通过氧化应激、参与DNA损伤等途径对生殖系统发挥毒作用。维生素E(Vitamin E)是人体当中,最富有的脂溶性抗氧化剂,它能够参加到氧自由基在体内的反应中,从而致使链式反应出现中断。有资料报道,维生素E的使用能够促进性激素分泌,使男子精子质量增加。ATP酶是机体中负责传送信息和传播能量的重要物质,ATP酶在体内水平的高低,会直接对细胞内外的Ca2+量产生影响。ATP酶活性降低会引发细胞内Ca2+超载,Ca2+则会引发膜磷脂降解、线粒体能量生成减少,导致组织功能和代谢紊乱。儿童和]PAHs职业接触者,作为PAHs的高危人群,目前却没有药物能够有效预防PAHs带来的危害。因此本研究用维生素E来探讨其是否对B[a]P所引起的雄性SD大鼠的生殖毒作用具有拮抗作用以及作用机制。目的:探讨维生素E对B[a]P所诱导的、对雄性SD大鼠的生殖毒性是否存在着有效地拮抗作用;通过观察和检测染毒大鼠的睾丸组织形态及组织内ATP酶活性和Ca2+浓度的改变,来探讨B[a]P的生殖毒性发生机制。并且,通过给予不同剂量的维生素E,来探讨维生素E与B[a]P之间是否存在着剂量反应关系。方法:将60只4周龄大鼠,随机地分入到空白对照组、溶剂对照组、B[a]P组、低剂量维生素E (10mg/kg/d)+B[a]P组、中剂量维生素E(50mg/kg/d)+B[a]P组和高剂量维生素E(100mg/kg/d)+B[a]P组中,B[a]P的实验用量为5mg/kg,持续灌胃处理30天。B[a]P溶于植物油中备用,溶剂对照组则会给予植物油灌胃。检测精液的质量,睾丸脏器系数,并观察睾丸的损伤状况;使用试剂盒检测睾丸组织中8-OHdG与MDA含量,SOD与GSH-Px活性以及细胞ATP酶活性,以此观测睾丸的氧化损伤情况及ATP酶的水平变化;通过对睾丸组织进行HE染色以及彗星实验,镜下观察睾丸形态学改变及生殖细胞中DNA损伤与否;荧光标记法测量睾丸Ca2+含量变化。结果:1、1)B[a]P染毒组与对照组相比,睾丸的脏器系数、精子数目和精子的活动度明显降低,并且精子畸形率出现了增高。2)高剂量维生素E的使用,使精子质量和睾丸脏器系数损伤明显好转。10 mg/kg/d剂量的维生素E,拮抗效果并不理想。3)HE染色显示,B[a]P暴露造成了睾丸组织生精细胞数量显著的减少。加入维生素E的各组,生精细胞的数量明显增多,维生素E缓解了生殖细胞损伤。2、B[a]P暴露组较对照组,睾丸组织中SOD、与GSH-Px的活性明显降低,而MDA与8-0HdG含量出现增高。在中剂量与高剂量的维生素E进行干扰后,SOD与GSH-Px的活性得到明显改善,MDA与8-0HdG的含量则明显降低。3、B[a]P染毒组Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活性明显低于对照组。中、高剂量维生素E+B[a]P组较B[a]P染毒组,Na+-K+-ATPas e与Ca2+-Mg2+-ATPas e活性显著增强。4.B[a]P染毒组Ca2+浓度增高显著,50mg/kg、100 mg/kg维生素E+B[a]P组Ca2+浓度降低明显,低剂量维生素E组却未见到明显变化。5、彗星实验发现,B[a]P暴露组彗星数量明显多于对照组,并且随着使用的维生素E剂量的增加,镜下观察到的彗星数目明显减少。结论1、B[a]P暴露诱导的生殖损害可能机制为:1)大鼠的睾丸组织发生了生殖细胞的氧化损伤。2)睾丸中发生了生殖细胞的DNA氧化损伤,造成了细胞凋亡。3)睾丸组织的损伤可能与ATP酶活性水平的降低以及Ca2+离子浓度的增加有关。2、1)维生素E可有效的缓解B[a]P所致的生殖损害的发生。2)其中,50mg/kg/d与100mg/kg/d剂量的维生素E对5mg/kg剂量的B[a]P所造成的组织损伤有比较好的拮抗效果。
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