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目的：1通过体外实验观察赫赛汀联合雷帕霉素对人胃癌细胞NCI-N87增殖、凋亡及周期的影响，评价赫赛汀联合雷帕霉素作用NCI-N87细胞是否存在协同作用；2观察赫赛汀联合雷帕霉素对人胃癌细胞NCI-N87中Her2蛋白、P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1表达的影响，初步探讨其诱导人胃癌细胞NCI-N87凋亡及下调相关蛋白的可能机制。方法：1常规培养人胃癌细胞NCI-N87。2采用流式细胞术（flowcytometry，FCM）检测人胃癌细胞NCI-N87和SGC-7901中Her2蛋白表达情况。3赫赛汀、雷帕霉素单药及联合作用NCI-N87细胞后，采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色法测定细胞光密度值（optical density，OD），计算出生长抑制率。研究赫赛汀、雷帕霉素单药及联合对NCI-N87细胞增殖的影响。4采用流式细胞术检测赫赛汀、雷帕霉素单药及联合对NCI-N87细胞周期分布、凋亡及Her2蛋白表达的影响。5采用Western blot检测赫赛汀、雷帕霉素单药及联合对NCI-N87细胞中P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1表达的影响。结果：1人胃癌细胞NCI-N87中Her2蛋白高表达，而SGC-7901中Her2蛋白未见明显表达。2不同浓度的赫赛汀对Her2阳性人胃癌细胞NCI-N87无论作用24小时、48小时还是72小时均未发现明显的细胞生长抑制作用。不同浓度雷帕霉素（0.1nmol/l、1nmol/l、10nmol/l、50nmol/l、100nmol/l）作用于NCI-N87细胞24小时后抑制率分别为7.77±1.12%、14.83±1.38%、25.03±1.79%、24.83±2.94%、24.03±2.38%；48小时后抑制率分别为15.90±1.66%、25.73±1.67%、32.70±1.75%、33.06±1.36%、32.97±2.15%；72小时后抑制率分别为22.83±1.33%、35.53±2.65%、45.23±2.01%、44.03±3.35%、44.27±2.31%。可以看出不同浓度的雷帕霉素作用于NCI-N87细胞24小时、48小时和72小时后均可抑制细胞的增殖。在一定浓度范围内（0-10nmol/l），随雷帕霉素浓度的增加，抑制作用逐渐增强，且随着雷帕霉素作用时间的延长，抑制作用也逐渐加强，各浓度组间存在统计学差异（P<0.01），与对照组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）。说明在一定浓度范围内雷帕霉素对NCI-N87细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖关系；雷帕霉素浓度为10nmol/l、50nmol/l和100nmol/l时，对NCI-N87细胞的抑制率差异有统计学意义（P>0.05）。赫赛汀联合雷帕霉素作用于NCI-N87细胞48小时后抑制率为57.78±2.75%，与单药组相比，对NCI-N87细胞的增殖抑制作用有显著统计学差异（P<0.01）。根据金氏公式检验得知，q值等于1.72>1.15，赫赛汀联合雷帕霉素具有协同作用。3赫赛汀（100ug/ml）、雷帕霉素（10nmol/l）单药及联合作用于NCI-N87细胞48小时后，G1期细胞百分数依次为49.87±1.14%、59.60±1.05%、72.83±0.87%；S期依次为34.27±0.67%、23.63±1.11%、11.6±1.25%；G2期依次为15.86±1.29%、16.77±1.06%、15.53±0.42%，对照组G1期细胞百分数为43.03±0.68%，S期为41.60±0.82%，G2期为15.37±0.42%，可见G1期细胞百分比明显上升，S期细胞百分比明显减少，使细胞阻滞于G1期，与对照组相比具有显著统计学差异(P<0.01)；G2细胞百分比变化不明显，与对照组相比无统计学差异(P>0.05)；联合用药组与单药组相比，G1期细胞百分比明显上升，S期细胞百分比明显减少，差异具有显著统计学意义(P<0.01)。4赫赛汀（100ug/ml）、雷帕霉素（10nmol/l）单药及联合用药作用于NCI-N87细胞48小时后凋亡率分别为3.38±0.45%、7.71±1.44%、33.71±2.05%，对照组为0.73±0.06%。赫赛汀单药对NCI-N87细胞无明显诱导凋亡作用，与对照组相比，无统计学差异（P>0.05）；其他实验组与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01）；联合组与单药组相比，具有显著统计学差异（P<0.01）。5赫赛汀（100ug/ml）、雷帕霉素（10nmol/l）单药及联合作用于NCI-N87细胞48小时后，FCM检测Her2蛋白表达的FI值分别为0.632±0.004、0.870±0.021、0.506±0.015；Western blot法检测P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1蛋白的表达量分别为0.430±0.045、0.623±0.031、0.110±0.046；0.570±0.053、0.320±0.046、0.120±0.026；0.387±0.086、0.370±0.662、0.117±0.050；对照组分别为0.943±0.042、0.887±0.025、0.683±0.031，提示赫赛汀、雷帕霉素单药或联合用药均可可下调Her2蛋白、P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1的表达，与对照组相比具有统计学差异（P<0.01）；联合用药组与单药组相比，差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：1赫赛汀单用对Her2阳性的人胃癌细胞NCI-N87没有体外杀伤作用，联合雷帕霉素后有明显的生长抑制作用，使细胞停滞于G1期，诱导人胃癌细胞NCI-N87凋亡，两药联合具有协同作用。2赫赛汀联合雷帕霉素可明显下调人胃癌细胞NCI-N87中Her2蛋白、P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1的表达。3赫赛汀联合雷帕霉素诱导人胃癌细胞NCI-N87的凋亡可能与引起细胞停滞于G1期、下调Her2蛋白、P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1的表达有关。