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目的:观察苦碟子注射液对复合因素所致啮齿目动物Wistar大鼠和偶蹄目动物贵州小型猪两种大小不同种属动物肝纤维化模型的影响,以证实苦碟子注射液对实验性肝纤维化有防治作用。
方法:两种动物均随机分为空白组、模型组、预防组、治疗组四组,均分成二个阶段重叠式分别进行,即造模及预防阶段和治疗阶段。(1)Wistar大鼠:除空白组外的其他三组前六周造模,用40%CCL4橄榄油(0.15ml/100g)和兔血清(0.15ml/100g)分别腹腔注射,一周两次,并用5%的乙醇溶液作为唯一的饮料,共六周;在前两周造模的同时,预防组给予苦碟子注射液0.4ml/100g(相当苦碟子生药8g),其他三组给予生理盐水(NS)0.4ml/100g,每天腹腔注射一次,共14天;治疗阶段:实验的第7周开始,治疗组给予苦碟子注射液0.4ml/100g(相当苦碟子生药8g),其余三组给予NS 0.4ml/100g,均为每天腹腔注射一次,共14天。(2)贵州小型猪:除空白组外的其他三组前八周造模,用40%CCL4橄榄油(0.5ml/kg)和兔血清(0.5ml/kg)分别腹腔注射,空白组用橄榄油和NS各0.5ml/kg分别腹腔注射,一周两次,共八周;在前四周造模的同时,预防组给予苦碟子注射液0.8ml/kg(相当苦碟子生药16g),其他三组给予NS 0.8ml/kg,每天腹腔注射一次,共28天。治疗阶段:实验的第九周开始,治疗组给予苦碟子注射液0.8ml/kg(相当苦碟子生药16g),其余三组给予生理盐水0.8ml/kg,均为每天腹腔注射一次,共28天。分别于实验末处死动物取血和肝组织块,测定各组动物血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白/球比值(A/G)和大鼠血清透明质酸(HA),层粘蛋白(LN),IV型胶原(IV-C),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量;光镜HE染色、Masson染色、Van Gieson染色及透射电镜观察肝脏组织病理学变化,以评价肝脏损伤程度和药物的防治作用。
结果:
1.苦碟子注射液能显著降低复合因素所致大鼠和贵州小型猪肝纤维化动物模型的血清ALT、AST含量,减轻肝损伤引起的ALB降低及A/G比例倒置。
2.苦碟子注射液能显著降低Wistar大鼠肝纤维化的HA、LN、PCⅢ、及Ⅳ-C含量。
3.光镜切片示苦碟子注射液能减轻Wistar大鼠和贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞变性、坏死,使增生的纤维成分减少,甚至消失。
4.电镜照片显示:苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞损伤,稳定质膜,使细胞间质中胶原纤维沉积减少。
结论:苦碟子注射液对复合因素所致啮齿目动物Wistar大鼠和偶蹄目动物贵州小型猪肝纤维化动物模型均有防治作用。