目的：建立塞北紫堇总生物碱有效部位制备方法,分离总生物碱中化学成分,采用分离得到的化合物作为质量控制指标,测定总生物碱有效部位中化合物的含量,采用总生物碱有效部位开展抗癌实验研究,完善药材质量标准,为塞北紫堇总生物碱有效部位新药开发奠定基础。方法：采用碱性乙醇提取制备粗提物,通过精制工艺制备总生物碱含量高于50%的有效部位；采用硅胶柱和重结晶分离法从总生物碱有效部位中分离单体化合物,并进行结构鉴定；采用分离得到的化合物作为质量控制指标,对总生物碱有效部位进行含量测定,建立总生物碱有效部位含量测定方法；采用总生物碱有效部位进行抗癌实验研究,明确药理活性；建立塞北紫堇药材中原阿片碱含量测定方法,完善药材质量标准。结果：1.建立了塞北紫堇总生物碱的制备方法,药材用碱性乙醇提取、浓缩干燥,得到粗提取物,粗提取物经过1%的盐酸溶液溶解滤过,滤液再用10%氢氧化钠碱液调节pH至10,采用二氯甲烷进行萃取制备塞北紫堇总生物碱,再经硅胶柱进一步纯化后得到含量大于50%的总生物碱有效部位。2.对塞北紫堇总生物碱有效部位进行了化学成分分离研究,通过硅胶柱层析和重结晶法分离总生物碱中化学成分,共得到5种单体化合物。在结构鉴定中根据其理化性质及ID-NMR、ESI-MS等波谱方法,共鉴定出5种化合物,包括原阿片碱、α-比枯枯灵、黄紫堇明碱、β-hydrastine、β-比枯枯灵,其中α-比枯枯灵、原阿片碱、β-hydrastine是首次从该药材分离得到。3.对总生物碱有效部位进行原阿片碱、黄紫堇明碱、α-比枯枯灵三种化学成分的含量测定研究,通过方法学实验考察,结果本法简单可行,方法重现性好,可以作为总生物碱有效部位质量控制方法,采用本方法对总生物碱有效部位进行含量测定,结果原阿片碱、黄紫堇明碱和α-比枯枯灵含量总和为33%。4.对塞北紫堇总生物碱有效部位进行了体外抗肿瘤活性筛选研究,选取的细胞瘤株分别是人前列腺癌细胞,乳腺癌细胞,胃癌细胞,肺腺癌细胞,卵巢癌细胞。结果显示总生物碱有效部位含药血清对乳腺癌、肺腺癌细胞有显著抑制作用。表明塞北紫堇总生物碱具有一定的抗肿瘤活性,但其量效关系不明确,有待后期深入研究。5.增加了塞北紫堇药材水分、灰分、酸不溶性灰分和浸出物检查项,修订了鉴别项,建立了药材中原阿片碱含量测定方法,结果显示原阿片碱在10.45μg/ml～104.51.μg/ml范围内呈良好的线性关系,R=0.9997；加样回收率为98.73%,RSD=1.06%。本法简单可行,方法重现性好,可以作为塞北紫堇药材质量控制方。结论：本研究制备的总生物碱有效部位化学成分明确、质量可控、且具有一定的抗癌活性,同时完善了塞北紫堇药材质量标准。本研究对新药开发应用具有十分重要的意义。(本课题的研究已申请国家专利)