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目的： 建立杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killer immunoglobulin-like receptor，KIR）2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR3DL1基因高分辨分型技术，获取浙江汉族人群KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR3DL1的等位基因和基因型频率；研究白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）10/10位点全相合的造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation，HSCT）供受者的KIR与其配基的配合数据，为临床选择供受者提供基础数据。 方法： 1.样本来自浙江汉族献血者随机样本、中心检测配型的供患者样本，全部经知情同意。样本全血基因组DNA抽提采用商用试剂盒，按照试剂说明进行操作。 2.KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR3DL1基因的存在或缺失采用PCR-SSP方法。 3.KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR3DL1基因高分辨检测方法为PCR-SBT。依据编码序列设计引物，对条件进行优化，PCR产物纯化采用酶法，按BigDye terminator v3.1 sequencing Kit（ABI公司）试剂盒操作进行测序反应，建立相应的等位基因测序分型方法。利用ABI Seqscape2.5软件对结果进行判读，参照IPDKIR Database数据库KIR多态性位点碱基情况对样本进行分型。 4.KIR基因型频率（genetype frequency，GF）采用直接计数法计算，即检测出基因型个数/N（N=样本数）；KIR基因频率（gene frequency，P）根据Hsu公式计算，P＝1-(1-f)；等位基因频率采用直接计数法计算，即某种等位基因个数/总的等位基因个数。 5.HLA-A、-B、-C、-DRB1和-DQB1基因分型采用商用试剂盒，按照试剂说明进行操作，包括PCR扩增、产物纯化、产物稀释和测序反应、测序产物纯化和电泳分析等流程。序列结果通过uType SBT HLA分析软件对测序结果进行分析，确定HLA等位基因的位点，并通过http://www.dorak.info/hla/link.html中的标准序列确定C1和C2组。 6.KIR基因分型方法采用PCR-SSO方法，按照试剂说明进行操作，包括PCR扩增、杂交、读数和分析等流程。通过Hla Fusion Research3.4软件对KIR结果进行分析，根据Genotype Reference List软件（http://allelefrequencies.net/），分析获取KIR基因型以及基因型编号。 结果： 1.建立了KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR3DL1基因PCR-SBT方法，特异性引物对扩增后可得到单一特异性条带，得到的扩增片段大小与预期结果相符合。双向测序反应后可得到清晰的测序序列，所有序列显示正常的测序反应峰。 2.100例样本中检测出KIR2DL1阳性样本98例，阴性样本2例；KIR2DL3阳性样本98例，阴性样本2例，98例KIR2DL3阳性样本中20例为KIR2DL2和KIR2DL3同时阳性，2例KIR2DL3阴性样本为KIR2DL2阳性；KIR3DL1阳性样本96例，阴性样本4例。在实验样本中共检测出KIR2DL1的5种基因型，3种等位基因；15种KIR2DL2/KIR2DL3基因型，2种KIR2DL2等位基因，8种KIR2DL3的等位基因；KIR3DL1的17种基因型，12种等位基因。 3.在80对HLA-A、-B、-C、-DRB1和-DQB1位点10/10位点全相合的造血干细胞移植供受者样本中，有53对（66.3％）供受者KIR-KIR错配；从供者KIR受体-受者配基模式分析发现KIR2DL1完全错配64对（80.0%），KIR2DL2/KIR2DL3完全错配5对（6.3%），KIR3DL1完全错配29对（37.2%）；受者KIR受体-供者配基模式分析发现KIR2DL1完全错配64对（81.0%），KIR2DL2/KIR2DL3完全错配5对（6.3%），KIR3DL1完全错配26对（34.7%）。 结论： 1.建立了KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3和KIR3DL1基因高分辨分型方法。 2.获取了浙江汉族人群KIR2DL1、KIR2DL2/KIR2DL3和KIR3DL1等位基因频率。 3.从KIR-KIR、KIR-配基（供者-受者）模式、KIR-配基（受者-供者）模式分析了80对HLA-A、-B、-C、-DRB1和-DQB1位点10/10全相合的供受者样本匹配性情况。