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犊牛是成年牛的基础,日粮中的蛋白水平对于犊牛的生长发育至关重要。因此,探索最适合犊牛的日粮蛋白质水平,对于后备牛培育及后续生产性能有着积极的意义。瘤胃是反刍动物的第一胃,日粮中蛋白质等营养物质的60%～80%在瘤胃内降解。从初生到断奶是犊牛瘤胃功能形成的关键时期。瘤胃上皮的发育水平直接影响瘤胃功能的发挥。翻译肿瘤调节蛋白(TCTP)是物种间高度保守的一种蛋白,能够通过调控细胞生长相关信号通路促进细胞的增殖和生长,研究TCTP在瘤胃上皮细胞发育过程中的作用和机制,有助于拓宽对瘤胃发育分子机制的了解,探索瘤胃发育的调控方法。本文主要研究了3～4月龄犊牛适宜日粮蛋白水平;以湖羊为模式动物,研究了瘤胃发育,探索了TCTP在反刍动物瘤胃上皮发育过程中的表达与功能。具体研究结果如下:1.不同日粮蛋白水平对3～4月龄中国荷斯坦犊牛生长性能、消化率及血液指标的影响本试验旨在研究3～4月龄的中国荷斯坦犊牛的适宜日粮蛋白水平。采用单因素试验设计,选择24头健康、体重相近的(84.77±3.0 kg)断奶犊牛,随机分为三组,分别饲喂能量(NE)水平为6.82 MJ/kg,蛋白水平分别为19.00%、21.00%和23.00%的三种日粮,分析日粮蛋白水平对犊牛生长性能、血清生化指标和消化率的影响。研究表明:饲喂19.00%、21.00%和23.00%三种蛋白水平日粮后,试验全组的日增重分别为1.19±0.16 kg/d、1.23±0.16 kg/d、1.24±0.13 kg/d,组间差异不显著;日粮蛋白水平对犊牛体斜长显著影响(P<0.05),23.00%蛋白组显著大于19.00%蛋白组;血清尿素氮含量随着日粮水平的增加而显著提高(P<0.01),23.00%蛋白组显著大于21.00%、19.00%蛋白组;甘油三酯和游离脂肪酸含量随着日粮水平的增加而显著提高(P<0.01),23.00%蛋白组显著大于19.00%蛋白组;日粮蛋白质水平对总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖等的影响不显著;粗蛋白、干物质、粗脂肪和中性洗涤纤维消化率随日粮蛋白质水平提高而减低(P<0.05),19.00%蛋白组显著大于23.00%蛋白组。综合试验犊牛日增重、体尺指标、血液指标和营养物质消化率等各方面的因素,19.00%蛋白水平的日粮对于3～4月龄犊牛最为合适。2.断奶前反刍动物瘤胃发育和TCTP在瘤胃上皮中的表达与功能研究本实验旨以羊为模式动物,研究了断奶前瘤胃发育和TCTP对瘤胃上皮的细胞增殖作用。选取D0、D30、D45、D60的健康、体重相近的湖羊各5只,屠宰后取瘤胃后背囊。结果表明:从初生到60日龄,羔羊瘤胃重和瘤胃乳头逐渐生长发育,其瘤胃乳头长度在60日龄达到4169.0±174.2μm,与10月龄的湖羊瘤胃乳头长度(4664.1±131.2μm)没有显著差异(P<0.05)。瘤胃乳头长度在30到45日龄阶段的生长速度最快,而30日龄时瘤胃液中乙酸/丙酸比例达到13.29,之后该比例随着日龄增长而下降且瘤胃生长速度下降。TCTP的蛋白表达水平从0日龄到45日龄逐渐升高,并在45日龄时达到高峰,在60日龄时又显著下降(P<0.05);30日龄和45日龄基底层细胞中Ki67阳性细胞的比例最高,45日龄略低于30日龄,但没有显著差异,在60日龄基底层细胞Ki67阳性细胞的比例显著低于30日龄和45日龄(P<0.05);Akt磷酸化水平在初生瘤胃上皮细胞中最低,在30日龄和45日龄中逐渐升高,到60日龄时又略微降低。综上所述,30至45日龄是瘤胃上皮生长发育的高峰。瘤胃上皮基底层细胞的增殖水平与TCTP的表达变化趋势一致。TCTP可能通过磷酸化Akt促进瘤胃上皮基底层细胞的增殖。本研究提示,3～4月龄犊牛的日粮适宜蛋白质水平为19.00%;30至45日龄是瘤胃上皮生长发育的高峰,该阶段瘤胃液中乙酸/丙酸比例最高,60日龄瘤胃上皮基本发育成熟;TCTP可能通过磷酸化Akt促进瘤胃上皮基底层细胞的增殖。