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目的:观察不同时间及不同浓度脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Robo4、Slit2和VE-cadherin表达的影响,探讨Robo4、Slit2和VE-cadherin在LPS诱导的血管内皮细胞损伤中的作用,同时为后续寻找脓毒血症临床诊断及治疗靶点提供实验基础。方法:体外培养HUVECs,分正常对照组(37C、5%CO2培养箱中常规培养24 h和48 h)和2个浓度LPS组(在正常对照组基础上分别加入终浓度为10ug/ml和100 ug/ml的LPS),每组重复实验6次。免疫荧光染色检测Robo4蛋白表达,western blot检测各组细胞Robo4、Slit2和VE-cadherin蛋白表达,RT-PCR检测Robo4、Slit2和VE-cadherin mRNA表达。结果:高剂量LPS组HUVECs在24 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin蛋白表达分别为0.48±0.08、0.75±0.11、0.64±0.12,较正常对照组1.36±0.11、1.64±0.17、1.55±0.15明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量LPS组HUVECs在48 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin蛋白表达分别为0.20±0.04、0.32±0.09、0.27±0.09,较24 h表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量LPS组HUVECs在24 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin mRNA表达分别为0.23±0.06、0.21±0.09、0.20±0.07,较正常对照组0.97±0.13、0.89±0.12、0.85±0.13明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量LPS组HUVECs在48 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin mRNA表达分别为0.10±0.04、0.10±0.05、0.08±0.03,较24 h表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);低剂量LPS组在24 h和48 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin蛋白表达较正常对照组均有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);低剂量LPS组在24 h和48 h检测Robo4、Slit2和VE-cadherin mRNA表达较正常对照组均有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量(100 ug/ml)LPS可下调HUVECs细胞Robo4/Slit2信号通路及其下游信号分子VE-cadherin蛋白和基因表达水平,并可能呈时间和浓度依赖性;LPS诱导的血管内皮细胞损伤机制可能与Robo4/Slit2信号通路下调有关;Robo4/Slit2信号通路可能与严重脓毒血症发生发展密切相关;血管内皮细胞Robo4表达程度可做为评估脓毒血症严重程度及预后指标。