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目的通过体外抑菌实验和体内抑菌实验,观察清热解毒中药双黄连、清开灵对产ESBLs大肠埃希菌的抑菌作用,中药与头孢哌酮-舒巴坦钠联合应用的协同抑菌作用,以及中西药联合应用的比例及时间窗,探讨中药消除产ESBLs大肠埃希菌耐药性的作用机理。方法(1)取来源于临床的ESBLs阳性的大肠埃希菌菌株,经ESBLs的筛选与确认,建立耐药菌模型,采用二倍稀释法测定实验药物MIC。配制双黄连粉针(冻干)、清开灵注射液、头孢哌酮-舒巴坦钠药液,按照实验分组加入相应药液,做对倍稀释。共设12组：阴性对照组、SHL组、QKL组、CPZ／SBT组、SHL+CPS组、QKL+CPS组、SHL+CPS 4h组、SHL+CPS 6h组、SHL+CPS 8h组、QKL+CPS 4h组、QKL+CPS 6h组、QKL+CPS 8h组,取实验菌悬液,依次加入各组实验试管中,使最终接种量为5×105CFU/ml。中西药联合组分别于4h、6h、8h后,加入0.5ml肉汤及头孢哌酮-舒巴坦钠0.5ml并依次做对倍稀释。35℃培养24h,肉眼观察抑制细菌生长的最低药物浓度即为MIC。(2)60只SD大鼠随机分为6组,每组10只,分别为：模型组、CPS组、SHL+CPS/H组、QKL+CPS/H组、SHL+CPS/L组、QKL+CPS/L组。各组均予多重药耐药大肠埃希菌(菌量2.5×108/ml)菌悬液尾静脉注射感染,造成大鼠败血症模型,注射菌悬液后1h血培养结果阳性,且大鼠出现感染性休克症状甚至死亡,视为模型成功,造模成功后即刻开始给药。模型组给予腹腔注射0.9%氯化钠注射液；CPS组注射CPS,350mg/kg,分2次/日；SHL+CPS/H组注射双黄连140mg/kg,qd,并于6小时内注射CPS,350mg/kg,分2次/日；QKL+CPS/H组注射清开灵2.3ml/kg, qd,6小时内注射CPS,350mg/kg,分2次／日；SHL+CPS/L组注射双黄连140mg/kg, qd,6小时内注射CPS,230mg/kg,分2次／日；QKL+CPS/L注射清开灵2.3ml/kg,qd,6小时内注射CPS,230mg/kg,分2次/日,连续给药5天,观察记录动物死亡率、体重、体温、一般情况,于给药前(感染后1h)、5天取血,进行血细菌培养及白细胞计数,实验结束后取肺、肝、脾组织进行组织病理学检查。结果(1)双黄连、清开灵、头孢哌酮-舒巴坦钠对产ESBLs的大肠埃希菌的MIC分别为23.04 g/L、62.50 mL/L、39.06 mg/L;SHL+CPS 6h为最佳效应组合,双黄连MIC降低了98%为1.44 g/L,头孢哌酮-舒巴坦MIC降低了50%为19.53 mg/L;QKL+CPS 4h为最佳效应组合,清开灵MIC降低了93.75%为3.91 mL/L,头孢哌酮-舒巴坦钠MIC降低了75%为9.76 mg/L。(2)经治疗后SHL+CPS/H组存活日数较模型组及西药组显著延长(P<0.05)；中西药联合各组SD大鼠与模型组和西药组比较,体温均下降明显(P<0.05)且迅速(P<0.01),感染后2～3d活动度均明显改善,感染后5d基本恢复正常(P<0.01/P<0.05),白细胞下降绝对值较显著(P<0.05),血培养转阴率高,病理损伤程度均明显减轻,SHL+CPS/H组、SHL+CPS/L组和QKL+CPS/H组体重于治疗后较快回升甚至增加(P<0.05)。结论通过体外和体内抑菌实验证实,双黄连、清开灵本身对产ESBLs大肠埃希菌具有一定的抑菌作用,两药分别与头孢哌酮-舒巴坦钠联合应用在体外具有明显协同抑菌作用,增加耐药菌对头孢哌酮-舒巴坦钠的敏感性,使耐药菌转化为敏感菌,其机理可能与消除R质粒有关；中西药联合应用可以增强抗菌效果,使头孢哌酮-舒巴坦钠体内抗感染作用更佳,保护感染大鼠模型,快速降温,减轻炎症反应,控制感染症状,调整大鼠代谢,保护生命重要器官,减轻病理损伤,提高疗效,降低西药剂量,具有“扶正祛邪”的功效。