艾蒿抑菌成分的分离提取及其功效研究

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艾蒿(Artemisia arsyi Levt.et Vant)是一种具有多种生物活性的植物,也是一种纯天然、绿色的可食用中草药。目前对于艾蒿中的活性化学成分的研究主要集中在茎、叶部分,主要包含挥发油类、黄酮类、桉叶烷类、三萜类和少许微量化学元素等,其中具有抑菌作用的有黄酮、挥发油和三萜类。本文以艾蒿为研究对象,通过两种不同的提取方法对艾蒿中的抑菌成分进行提取,从而确定最佳的提取工艺。对提取的艾蒿抑菌成分进行抑菌功效研究,然后对艾蒿抑菌成分进行安全性评价。通过试验得到以下结论:(1)、乙醇浸提法,通过单因素试验,根据中心组合(Box-Behnken)试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析方法,经Design-Expert7.0软件设计进行多元回归分析,结果表明,乙醇浓度62%、浸提温度72℃、浸提时间8h、料液比1:20,该条件下艾蒿抑菌圈直径为2.47cm。(2)、超声波辅助提取法,通过单因素试验,根据中心组合(Box-Behnken)试验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析方法,经Design-Expert7.0软件设计进行多元回归分析,结果表明,超声功率270w、超声时间35min、乙醇浓度51%、浸提温度63℃、乙醇浸提时间6h、料液比1:15,该条件下艾蒿抑菌圈直径为2.78cm。(3)、对超声波辅助法提取的艾蒿抑菌成分进行抑菌试验。由结果可知,艾蒿抑菌成分对革兰氏阴性菌:大肠杆菌、肠炎沙门氏菌;革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌;真菌:啤酒酵母、青霉菌及黑曲霉均具有较好的抑制作用。且艾蒿抑菌成分对青霉菌、黑曲霉的最低抑菌浓度为50mg/mL,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、肠炎沙门氏菌、啤酒酵母的最低抑菌浓度为25mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为12.5mg/mL。(4)、对艾蒿抑菌成分进行安全性评价和毒理学研究,主要分为三个试验阶段:急性毒性试验;遗传毒性试验和亚慢性毒性试验。艾蒿抑菌成分提取物的小鼠急性经口毒性试验证明该物质对小鼠的急性毒性LD5o均大于20g/kg-bw。初步说明该物质无毒。遗传毒性试验主要通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验,结果均为阴性,表明艾蒿抑菌成分提取物在所研究剂量范围内无遗传毒性。亚慢性毒性试验通过30天喂养试验观察各项指标均无明显影响,说明在该染毒剂量范围内,艾蒿抑菌成分提取物未出现明显毒副作用。上述结果表明,艾蒿抑菌成分具有良好的安全性,可以在食品领域作进一步开发利用。
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