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目的:研究姜黄消痤搽剂中有效成分松油烯-4-醇对痤疮丙酸杆菌、常见院内感染细菌的体外抗菌效果,进一步论证姜黄消痤搽剂对痤疮治疗作用及其抗菌疗效。进行痤疮丙酸杆菌对红霉素的耐药机制的探讨,为以后姜黄消痤搽剂的靶向治疗及改善耐药现状提供理论依据。 方法:1、采用琼脂稀释法进行松油烯-4-醇、红霉素、米诺环素、多西环素、甲硝唑对痤疮丙酸杆菌标准株(ATCC6919)的体外药敏实验。 2、次浓度诱导痤疮丙酸杆菌标准株对红霉素耐药。 3、采用琼脂稀释法进行松油烯-4-醇、米诺环素、多西环素、甲硝唑对诱导耐药的痤疮丙酸杆菌的体外药敏试验。 4、提取痤疮丙酸杆菌标准株及耐药株的DNA,合成23S rRNA基因的引物,进行PCR,测序后探讨23S rRNA基因的突变情况。 5、采用液体稀释法研究左氧氟沙星、头孢他啶、多西环素分别对大肠埃 希菌临床株、金黄色葡萄球菌临床株、表皮葡萄球菌临床株、肺炎克雷伯菌临床株、铜绿假单胞菌临床株的作用;庆大霉素对铜绿假单胞菌的作用,然后由松油烯-4-醇作用于其中的耐药株及大肠埃希菌标准株(ATCC25922)。 6、根据卫生部《消毒技术规范》进行松油烯-4-醇的皮肤消毒的现场试验。结果:次浓度法成功诱导痤疮丙酸杆菌对红霉素耐药。体外药敏试验结果显示,痤疮丙酸杆菌标准株与耐药株对松油烯-4-醇均敏感。与多西环素、米诺环素、甲硝唑相比,痤疮丙酸杆菌对松油烯-4-醇不容易产生耐药。痤疮丙酸杆菌耐药机制探讨中,提取出完整的痤疮丙酸杆菌标准株及耐药株的DNA,PCR后测序,结果显示:痤疮丙酸杆菌耐药株的23S rRNA基因在2040bp处缺失碱基A,在2424bp处插入碱基T。院感耐药的大肠埃希菌临床株、金黄色葡萄球菌临床株、表皮葡萄球菌临床株、肺炎克雷伯菌临床株、铜绿假单胞菌临床株对松油烯-4-醇均敏感。在室温22℃±1℃的条件下,浓度为5%的松油烯-4-醇对自愿者前臂皮肤上的自然菌进行擦拭消毒,作用2min杀灭对数值均≧1.00。 结论:次浓度法诱导痤疮丙酸杆菌对红霉素耐药的方法有效。痤疮丙酸杆菌标准株及耐药株对松油烯-4-醇均敏感。与多西环素、米诺环素、甲硝唑相比,痤疮丙酸杆菌不容易对松油烯-4-醇耐药。常见院内感染细菌的耐药株对松油-4-醇敏感。浓度为5%的松油烯-4-醇对于前臂皮肤上的自然菌杀灭率高。