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目的：1、探讨成年大鼠OECs的分离培养、纯化增殖和鉴定方法。2、探讨体外联合培养OECs和BMSCs的可行性及形态学观察。3、探讨体内移植OECs对脊髓损伤的修复效果。 方法：1、分别采用3种不同的分离方法进行OECs的分离，获得的细胞悬液在同一条件下进行培养，在第10天时对细胞的数量和形态进行比较和观察。2、分别采用3种不同的纯化方法对OECs进行纯化，在第10天时对细胞的纯度进行比较。3、将分离纯化后的OECs分为两组，一组在纯化后加入bFGF，另一组则不加入试剂，每两天进行细胞计数，持续计数到第10天，对获得的数据进行比较。4、通过免疫荧光方法采用P75抗体对原代培养的OECs和传到第10代的OECs进行鉴定。5、将培养的OECs和BMSCs消化制成细胞悬液，以相同比例接种，接种密度为104／ml。10天后将联合培养的细胞置于倒置相差显微镜下进行形态学观察，并于鉴定前两天加入细胞掺入剂BrdU，应用P75抗体和BrdU抗体对联合培养的细胞进行免疫荧光鉴定。6、制造成年S-D大鼠T10脊髓完全离断损伤模型，将动物分为正常对照组、治疗组和手术对照组。正常对照组：不作任何处理。治疗组：在造模后14天通过微量注射法将OECs移植于体内。手术对照组：在造模后14天采用同样方法注射DMEM。移植后8周进行判定：①通过称重观察各组动物的体重变化；②应用改良Tarlov功能评分对动物的运动功能进行评分，对评分结果进行比较统计；③应用H-E染色观察动物脊髓损伤处的病理变化；④采用BrdU抗体进行免疫荧光检查来观察OECs移植后在体内的存活及迁徙情况；⑤采用HRP逆向示踪方法观察中脑组织中被标记神经元的数目。 结果：1、三种分离方法培养的OECs在10天时细胞形态相同，但是直接分离法获得的细胞数量最多，与其他两组相比具有统计学意义（p＜0.001）。2、差速贴壁法+化学抑制法的纯化程度最高，可以达到95％左右，与其他两组相比具有统计学意义（p＜0.001）。3、bFGF加入组的细胞数量增加明显，两者相比具有统计学意义（p＜0.05）。4、原代培养的OECs和第10代OECs荧光鉴定显示细胞膜均呈绿色荧光。5、联合培养的细胞在24h内均完全贴壁，培养5天后镜下可见细胞形态主要有三种：①双极、三极或多极形，②短梭形，突起较短，③扁圆形或不规则形。到第10天时部分细胞相互编织成网，部分细胞生长呈条索状，相互平行。荧光鉴定显示：荧光双标阳性者（既发红色荧光又发绿色荧光）为OECs，只发红色荧光而不发绿色荧光者为BMSCs。6、移植后8周：①术后三组实验动物的体重变化：正常对照组的体重在观察期间体重增加，治疗组及手术对照组体重在造模后均出现减轻，在造模后2周降至最低，此后治疗组体重增加明显，手术对照组体重增加不明显，两者比较具有统计学意义（p＜0.05），但是两组的体重均低于正常对照组（p＜0.05）；②术后三组动物的改良Tarlov评分：正常对照组在观察期间得分无明显变化，远远高于其他两组动物。治疗组和手术对照组在造模后2周内得分均为0分，移植后治疗组得分逐渐增加，手术对照组增加不明显，两者比较具有统计学意义（P＜0.01）。两组得分远远落后于正常对照组（p＜0.01）；③组织病理学（H-E）检查：正常对照组脊髓结构完整，黑白