基于克隆文库法研究不同香型大曲微生物群落结构

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大曲作为白酒酿造中微生物的重要来源,其质量直接影响到白酒的酒质和出酒率。为进一步了解大曲微生物群落组成与白酒香型间的关系,本试验以汾酒清香型大曲(清茬曲、后火曲、红心曲)、泸州老窖浓香型大曲及郎酒酱香型大曲共5个大曲样品为试验研究对象,采用克隆文库技术与PCR-RFLP技术相结合的手段,对不同香型大曲微生物群落组成进行比较研究,得到以下结果:(1)不同香型大曲细菌群落组成:①清香型三种大曲细菌均分布于芽孢杆菌纲、放线菌纲及变形菌纲;其中清茬曲的优势细菌群为乳杆菌属和葡萄球菌属(占全部克隆子的比例分别为37.78%,22.22%);后火曲的优势细菌群为乳杆菌属、葡萄球菌属、芽孢杆菌属、魏斯氏菌属(占全部克隆子的比例分别为35%,16.67%%,16.67%,13.33%);红心曲的优势细菌群为乳杆菌属、芽孢杆菌属、高温放线菌属(占全部克隆子的比例分别为26.67%,28.89%,17.78%)。②浓香型大曲主要分布于芽孢杆菌纲、放线菌纲及梭菌纲,其优势细菌群为魏斯氏菌属、高温放线菌属和乳杆菌属(占全部克隆子的比例分别为30.35%,28.57%,19.65%)。③酱香型大曲主要分布于芽孢杆菌纲,其优势细菌群为枝芽孢杆菌属和高温放线菌属(占全部克隆子的比例分别为44.83%,43.1%)。(2)不同香型大曲真菌群落组成:①清香型三种大曲真菌均分布于酵母目和毛霉菌目。清茬曲的优势真菌群为毕赤酵母属和根霉属(占全部克隆子的比例分别是66.7%和30%);后火曲的优势真菌群为毕赤酵母属(占全部克隆子的比例是80.24%);红心曲的优势真菌群为根霉属和横梗霉属(占全部克隆子的比例分别是38.89%和33.3%);②浓香型大曲内真菌分布于散囊菌目、毛霉菌目和酵母目,其优势菌群为曲霉菌属和复膜孢酵母属(占全部克隆子的比例分别为36.9%,25%);③酱香型大曲内真菌也分布于散囊菌目、毛霉菌目和酵母目,其优势菌群为曲霉属和嗜热真菌属(占全部克隆子的比例分别为40.26%和38.96%)。(3)不同香型大曲微生物群落组成比较:①5个大曲样品细菌多样性由高到低依次为:后火曲>清茬曲>浓香型大曲>红心曲>酱香型大曲。真菌多样性由高到低依次为:浓香型大曲>红心曲>酱香型大曲>清茬曲>后火曲。②不同香型大曲间细菌和真菌群落组成均存在明显差异,且随着大曲制曲品温的升高,耐高温的芽孢杆菌、高温放线菌、嗜热或耐热霉菌所占的比例也逐渐增大。③本研究还检测到了传统培养方法未检测到的枝芽孢杆菌(Virgibacillus)、明串珠菌(Leuconostoc)、葡萄球菌(Staphylococcus)、链霉菌(Streptomyces)、高温放线菌(Thermoactinomyces)、糖多孢菌(Saccharopolyspora)等细菌类群;扫帚状曲霉(Aspergillus penicillioides)、Xeromyces bisporus、Thermomucorindicae-seudaticae、Trichomonascus ciferrii等真菌。
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