加利利链霉菌(Streptomyces galilaeus)AF1的发酵条件优化及其代谢产物分离

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiyongde
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
加利利链霉菌(Streptomyces galilaeus)AF1是课题组自主分离的菌株,前期研究结果表明:该菌株代谢物对革兰氏阳性菌具有良好的杀菌和抗菌活性,但对革兰氏阴性菌不敏感,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),其最小抑菌质量浓度(MIC)为68μg/mL;同时具有一定的抗真菌活性,0.3mg/mL的发酵液提取物对香蕉枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)抑菌率达94.1%;能导致金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌静息细胞的细胞壁破裂,具有明显的杀菌活性,与现有抗生素的作用机理相比,具有明显的新颖性。本文在课题组前期对AF1抗菌代谢物在菌体内的分布和培养基初步优化的基础上,研究接种方式、表面活性剂对AF1菌株生长和抗菌生物活性物质代谢及其分布的影响,以期提高加利利链霉菌AF1的发酵效率;并对AF1菌株代谢产物的分离进行了初步研究。菌丝体形态特征观察、发酵液中的总糖和还原糖量的动态变化、发酵液pH值的动态变化、以及其发酵液中抑菌活性物质积累的研究结果表明:孢子、孢子·菌丝和菌丝三种接种方式对加利利链霉菌AF1发酵过程的影响不同,不同接种方式导致菌体形态、总糖含量、还原糖、发酵液pH值和抑菌圈直径均存在差异,其中孢子接种的菌丝球细小致密、表面较光滑、生长周期同步,虽然生长延迟期较长,但是其对淀粉的利用更充分。孢子接种量为5×106个/100mL时,抑菌圈直径是菌丝接种的1.17倍,表明采用孢子接种更利于发酵生产抗生素。添加表面活性的单因素试验优化结果表明,吐温-80、曲拉通X-100、山梨醇等表面活性剂能提高发酵液中抗菌活性物质积累量,最佳添加时间为接种后120h。采用Box-Behnken试验设计和响应面分析对表面活性剂添加浓度进行优化,得出以加利利链霉菌AF1发酵液抑菌圈直径为响应值(Y)的回归方程:Y=19.07+0.94X1+0.52X2-0.49X3+1.15X1X2+0.17X1X3+0.56X2X3-2.56X12-2.83X22-3.03X32,推导出表面活性剂的最优添加条件为:吐温-80:8.85g/L、曲拉通X-100:2.14 g/L、山梨醇:3.84g/L。三种表面活性剂组合优化后,发酵液抗菌活性提高了25.45%,采用流式细胞仪测定法观察了添加表面活性对AF1细胞膜通透性的影响,结果表明:添加表面活性剂可以极显著增加细胞膜通透性,导致胞内活性物质的外排量增加,进而提高了抑菌活性物质的生物合成量。采用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和薄层层析制备等方法对加利利链霉菌AF1菌株的发酵液粗提物进行了分离纯化,得到了一个化合物,经过核磁共振分析确定其为蒽醌类化合物4-脱氧-ε-吡咯霉酮。
其他文献
视网膜疾病是眼科疾病最常见的病症,它严重地影响着人类的视觉。近年来,视网膜疾病患者人数在逐渐增多,这引起了广泛的关注。视网膜层组织结构的改变是眼底疾病最明显的特征之一,常见的情况是视网膜厚度变化甚至某几层视网膜的消失。光学相干断层成像(OCT)是一种具有图像分辨率高、对眼睛没有伤害、不需要接触眼睛等特点的新型眼底成像技术,它能够直接的呈现视网膜层结构的各个细胞层。运用OCT,医生可以通过直接观察视
氟虫腈是一种苯基吡唑类杀虫剂,对水稻害虫具有很好的防控效果,但是对非靶标生物的毒性比较高。本文通过采用HPLC对氟虫腈和糖基氟虫腈在鱼、蚯蚓和蜜蜂体内的吸收的含量进行
普鲁兰酶作为一种淀粉脱支酶可以高效催化普鲁兰糖、支链淀粉等底物中α-1,6-糖苷键的水解,在食品加工、生物能源、制药及化工等领域有广泛的应用。目前,尽管有很多研究集中
随着“互联网+”技术的飞速发展,人类社会已经进入网络化、智能化、数字化时代。人们日常生产与生活更多地依赖于各种复杂系统,而保障这些系统安全可靠运行的前提是明确它们
目的:研究构建模拟角膜基质创伤修复过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-α)空间动态分布的体外三维培养系统。方法:从新鲜牛眼中分离角膜基质细胞,用含体积分数10%FBS的DMEM/F12培养基进行培养,而后构建Pellet体外三维培养模型进行培养。将Pellet分为有透析袋组和无透析袋组,置入Transwell小室系统上下室中培养48h后换液,上
“可复制性项目”,尝试复制权威期刊的100篇心理学研究,却不到一半成功了,这使心理学群体很惊讶,也指出该领域的严重可复制性问题。根据我们的调查,跨文化适应领域研究中的主要模型很有可能也存在同样的问题。金荣渊的跨文化适应模型(Kim,2001),虽然影响力很大,但我们认为其在中国语境的适用不够充分,我们无法保证其在这个文化环境下对适应现象的解释力。中国正是经历着外籍学生与外籍工作人员的不断增长的国家
镍铁基析氧催化剂具有很高的电催化活性和成本效益,是最有望于应用于从太阳能到氢能的大规模碱液电解水反应的阳极材料之一。近年来国内外对析氧催化剂进行了广泛的研究,以了
纽结和链环理论的核心问题是寻找既可以很好地将纽结和链环分类,又易于计算的纽结和链环的不变量,而纽结和链环的棍棒指标就是其中之一.迄今为止,国内外的数学家们已经从多种
本世纪初,我国提出对外汉语的主要教学目的在于培养学习者使用汉语进行跨文化交际的能力。经过一段时间的教育教学实践,虽然对外汉语教学取得了一定的成果,但仍需进一步的研究来推动其教育实践的发展。目前,在各种类型的对外汉语课程中,以交际为主的对外汉语口语课程对于跨文化交际能力的培养有着十分重要的作用。口语课程为在华留学生提供的交际机会和口语交流机会是其它类型的汉语课程不可替代的。同时,对口语课程的教学理论
聚烯烃材料具有易加工、耐化学腐蚀、性价比高等优点,广泛应用于轨道交通、电线电缆、电子电器等领域。但聚烯烃易燃,赋予其优异的阻燃性能具有重要意义和价值。膨胀型阻燃剂